药物发现的激酶生物学
蛋白质和脂质激酶参与各种各样的病理条件。因此，激酶生物学是药物发现研究的一个重要领域。几种生物发光分析方法可用于查询化合物结合或抑制生化和细胞形式的激酶的能力，适用于高通量或选择性分析。
检测一系列激酶的活性
ADP- glo™激酶检测具有较高的动态范围，并在低ATP到ADP转换时产生强烈的信号，使其非常适合筛选低活性激酶，如生长因子受体酪氨酸激酶。该检测方法可用于ATP浓度高达1mM的情况下，这对ATP Km值高的激酶很重要。
ADP-Glo™检测是一种适用于任何激酶和底物的通用检测方法。这里展示了激酶活性曲线的代表性例子。
查看我们的完整范围激酶生化检测．
查看所有激酶酶系统
NanoBRET™TE激酶分析
NanoBRET™靶靶参与(TE)细胞内激酶检测基于NanoBRET™系统，这是一种能量转移技术，旨在测量活细胞中的分子接近性。NanoBRET™TE检测通过竞争性置换NanoBRET™示踪剂，在细胞中可逆结合到NanoLuc®荧光素酶激酶融合物，来测量被测化合物的表观亲和力。
- 可提供超过340种测定方法。
- 定量测量测试活性细胞中激酶的化合物亲和力和分数占用率，以获得更多的生理相关信息。
- 这些测定测定全长激酶和被测化合物之间的相互作用。
- 现成使用，激酶特异性分析提供了一个简单的工作流程和高通量兼容性
- 检测多种激酶抑制剂类型，如不同结合模式的抑制剂(包括I型、II型、变构型和共价型)
- 用动力学分析测量测试化合物与激酶结合的持久性(停留时间)
NanoBRET™TE激酶分析的应用。该测定法可以测量平衡条件下的测试化合物亲和力(上图)，或非平衡条件下的停留时间(下图)。
NanoBRET™TE激酶检测所需材料。Promega提供单独的激酶- nanoluc®融合载体和适当的NanoBRET™TE激酶分析。对于一个给定的激酶，推荐的NanoBRET™TE激酶检测方法和应用说明可以在激酶靶参与选择表．你需要提供细胞和细胞培养试剂。示踪剂和底物/抑制剂组合也可作为独立产品提供。leyu乐鱼网
一个。
B。
检查细胞亲和力和在活细胞中的停留时间可以提供与激酶结合的化合物的更完整的图像。本例使用NanoBRET™TE ABL1激酶检测和几种靶向慢性粒细胞性白血病(CML)的药物。第一代CML药物伊马替尼的结合较弱(一个)和较短的停留时间(B与第二代(达沙替尼)和第三代(Ponatinib)药物相比。Ponatinib表现出类似的亲和力(一个)与达沙替尼相比，但停留时间要长得多(B）.
了解更多关于NanoBRET™激酶靶接合分析
了解更多关于生化激酶选择性分析产品leyu乐鱼网
细胞激酶选择性分析
我们的新化合物激酶细胞选择性分析服务利用NanoBRET™TE技术的优势，定量测量活细胞中化合物与激酶的直接结合。在Hek293细胞中瞬时表达的192-或234-激酶面板中，化合物可以在单浓度下检测每种激酶。输出包括被测化合物相对于每个被测激酶的占用率。
使用NanoBRET™TE细胞内激酶分析的激酶细胞选择性分析允许:
- 独特的药物和化学探针开发。
- 通过对广谱激酶或激酶亚族的综合分析，更好地确定候选化合物的细胞内选择性，并帮助药物再利用。
论文:基于单一示踪剂的活细胞中广谱激酶谱分析NanoBRET协议．
了解更多关于我们的激酶选择性分析服务。
一个。
B。
生成克唑替尼细胞激酶选择性谱。答:克唑替尼对一组选择性激酶的占用率;B:两个独立重复的克唑替尼靶占用率的分析间相关性分析。
联系我们向我们的激酶分析服务提交问题或服务请求。
磷酸化和途径分析
Lumit™免疫分析细胞系统是一种敏感的发光抗体检测方法，用于检测磷酸化和研究靶向主要激酶信号通路特定节点的抑制剂。
- 较少化合物的干扰;只需要一个光度计
- 同质的“添加和读取”格式适合高通量筛选
- 内源性底物消除了细胞工程的需要，检测方法与任何细胞类型兼容，包括原代细胞
- 敏感检测允许在少量细胞上进行分析
- 检测磷酸化蛋白不需要免疫沉淀步骤
- “自己做”实验可以适用于任何感兴趣的途径或目标
Lumit™免疫分析细胞系统的原理。NanoBiT®荧光素酶的LgBiT和SmBiT亚基与来自两个不同物种的二抗(抗兔、抗鼠或抗山羊)结合。使用Lumit™兼容的裂解缓冲液(digitonin)裂解细胞，通过添加含有针对该蛋白的两种主抗体(用户提供)以及SmBiT和lgbit结合的二抗的抗体混合物来检测目标蛋白。一抗/Lumit™二抗复合物与其对应的表位结合，使NanoBiT®亚基非常接近，形成活性NanoLuc®荧光素酶，该酶产生光的比例与目标蛋白的数量成正比。
查看所有Lumit™免疫分析细胞系统
