双荧光素酶报告检测系统

双荧光素酶报告物(DLR™)检测系统提供了执行两种报告物检测的有效方法。在DLR™试验中，萤火虫(Photinus pyralis),Renilla（Renilla reniformis或海三色堇)荧光素酶是从单个样品中连续测定的。

首先通过添加荧光素酶分析试剂II (LAR II)来测量萤火虫荧光素酶报告物，以产生持续至少一分钟的发光信号。在量化萤火虫的发光后，这个反应被猝灭，和Renilla在同一样品中加入Stop & Glo试剂可同时启动荧光素酶反应。两种测定都可以在大约4秒内完成，使用光度计和试剂自动注入器。在DLR™检测系统中，两种报告均产生与阿托梅勒的线性分析(<10^-18年)的敏感性和无内源性活性的实验宿主细胞。此外，DLR™检测的集成格式提供了转染细胞或细胞游离转录/翻译反应中两种报告因子的快速定量。

为了获得双荧光素酶®检测的最佳结果，我们建议使用经过验证的光度计。这些光度计符合DLR标准伊迪法官明确指出™。有关合格仪器的名单，请浏览DLR伊迪法官明确指出™已验证的亮度计页面。

pGL4荧光素酶报告载体设计用于DLR™检测系统。一个Renilla具有本构表达的荧光素酶载体可与任何实验性萤火虫荧光素酶载体联合使用，共转染哺乳动物细胞。

给猫的通知。# E1960和E1980:提供足够的被动裂解缓冲液，在96孔板中培养细胞进行1000次测定(通常为每孔20μl 1X PLB)。对于需要更多裂解试剂的应用(例如，>100μl/井)，额外的被动裂解缓冲液可以单独购买。

分析优势

• 归一化到Renilla荧光素酶内部控制允许更准确的结果。
• 样品不需要分裂，节省盘子和时间。
• 允许研究弱启动子、低水平表达/调控和转染不良细胞中的表达。
• 线性除以7个对数;非常活跃的样品通常不需要稀释。