细胞活力和细胞毒性测定
我们提供广泛的测定方法和试剂,用于测定单层细胞培养物、3D微组织、原代细胞、干细胞、细菌培养物和病毒感染细胞中的细胞活力和细胞毒性。许多Promega细胞活力和细胞毒性试验可以与凋亡和其他试验相结合,以确定细胞死亡的机制,并从井对井,板对板和日常的数据进行敏感的比较。
细胞活力和细胞毒性测定是基于比色法、荧光法和生物荧光检测化学。实时,活细胞分析随着时间的推移反复监测,并从单个分析井生成多个数据点。端点分析可以提供敏感的,高通量的检测格式,以确定细胞健康。
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细胞活力和细胞毒性分析导论
细胞活力和细胞毒性测定测定与活细胞或非活细胞相关的细胞或代谢变化。这些分析可以检测结构变化,如细胞死亡时膜完整性的丧失或指示活细胞的生理和生化活动。
金标准和最敏感的细胞活力测定法是CellTiter-Glo®发光细胞活力测定法,可测量细胞内ATP。ATP测定快速溶解细胞,提供ATP酶抑制剂和提供荧光素酶反应成分。光的产生与活细胞的数量成正比。
Promega还提供基于比色,荧光和生物发光的活性测定,基于活性细胞的降低潜力。这些包括比色法(CellTiter 96®AQueous一种溶液),荧光(CellTiter-Blue®活力测定)和生物荧光(RealTime-Glo®MT细胞活力测定)测定选项。RealTime-Glo®MT细胞活力测定法是一种非溶性测定法,可根据细胞的还原电位随时间持续监测细胞活力。
细胞毒性试验测量与细胞死亡时膜完整性损失相关的参数。细胞毒性试验可检测到细胞不应释放的胞质蛋白,除非细胞已失去膜完整性和蛋白已泄漏出细胞。乳酸脱氢酶(LDH)释放是一种被广泛接受的细胞死亡测量方法,可以用生物发光LDH- glo®检测。CytoTox-Fluor®检测使用荧光肽底物来测量从失去膜完整性的细胞中释放的“死细胞蛋白酶”活性。另外,细胞毒性试验可以检测细胞不渗透染料在膜活性丧失时进入细胞的能力。CellTox™Green是一种荧光DNA结合染料,在细胞死亡时结合DNA并产生稳定的信号,可以在实时细胞毒性测定中测量。