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由于检测到的生物标记物的稳定性有限,基于检测释放到培养基中的生物标记物的细胞毒性测定在72小时或更长时间的长期暴露中可能低估细胞毒性。CellTox™绿色细胞毒性试验提供了一种简单、快速和准确的方法,以确定在培养中的细胞长期暴露期间或之后的毒性效应。CellTox Green可以与其他方法在多重检测中结合,以确定毒性机制,并且可以轻松地从96- 1536孔板格式扩展。
CellTox™绿色染料结合细胞膜完整性受损的细胞DNA。
剂量和暴露依赖性的细胞毒性增加
在本实验中,硼替佐米在4- 24小时时间点对K562细胞造成了明显的细胞毒性。之后时间点的附加荧光表明膜完整性的持续丧失是对剩余细胞的细胞毒性作用的结果。在播种时添加CellTox™绿色染料。
在这里,CellTox™绿色染料与K562细胞混合,这些细胞被镀,然后添加化合物。在72小时暴露结束时加入CellTiter-Glo®细胞活力测定试剂,并测量发光(活力)。这两种相反的细胞健康测量结果导致了EC50协议。
CellTox™Green可在动力学模式下用于确定细胞毒性的开始,随后在同一样品孔中与Caspase-Glo®3/7分析进行多路复用,以确认caspase-3/7在适当时间的激活。
在这个例子中,K562细胞暴露于抗增殖化合物甲氨蝶呤72小时。加入CellTox™Green Dye以测定细胞毒性,然后在同一样品孔中加入CellTiter-Glo®试剂以测定活性。单独的活力测定可能会误报该化合物为细胞毒性物质,因为与未处理的对照相比,处理过的样品中的细胞更少,继续增殖。用细胞毒性实验进行多路复用,结果显示由于膜完整性受损,信号没有变化,表明生长受到抑制,而没有细胞毒性。
溶解的解决方案
分析缓冲
CellTox™绿色染料,1000倍
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专利申请中。
延伸因子2激酶通过抑制蛋白质合成而不诱导自噬来促进细胞存活。
以生物发光为基础的LDH检测,用于敏感检测细胞数量低的样品,包括3D显微组织的细胞毒性。
J2380, J2381
一种预测潜在线粒体功能障碍的有效分析方法。
G8000, G8001
一种易于使用的,基于平板的发光检测caspase-3/7活性的方法。
G8090, g8091, g8093, g8092
一种均匀的,以ldh为基础的定量非活细胞的荧光测定方法。
G7890、G7891 G7892
一种单一试剂加入、均质荧光测定法,用来测定细胞群中死亡细胞的相对数量。
G9260、G9261 G9262
一种具有多重能力的非裂解荧光细胞活力测定方法。
G6080、G6081 G6082
用均匀的再青蛋白荧光法监测细胞活力。
G8080、G8081 G8082
用于检测发光、荧光和吸光度的高性能微板读取器。
GM3000
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