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ROS-Glo™H2O2分析

G8820_ROS-Glo-H2O2-Assay-10ml
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过氧化氢的特异性直接检测(H2O2

  • 快速检测涉及一个简单的双试剂添加协议
  • 底物与H直接反应2O2;不需要HRP作为偶联酶

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ROS-Glo™H2O2分析
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ROS- glo™H₂O₂测定法是一种均质、快速、灵敏的生物发光测定法,可直接在细胞培养或特定酶反应中测量过氧化氢(H₂O₂),一种活性氧(ROS)的水平。衍生荧光素底物与样品孵育并与H₂O₂直接反应生成荧光素前驱体。添加ROS-Glo™检测溶液将前体转化为荧光素,并提供Ultra-Glo™重组荧光素酶,产生与样品中H₂O₂水平成正比的光信号。

ROS-Glo™H₂O₂分析化学

H₂O₂底物与H₂O₂直接反应生成荧光素前驱体。ROS-Glo™衬底检测解决方案将荧光素前体转化为荧光素,并提供Ultra-Glo™荧光素酶来产生光。光信号与样品井中H₂O₂的含量成正比。

用于细胞或生化检测的ROS-Glo™H₂O₂测定协议概述

该检测方法采用简单的双试剂添加方案,不需要对样品进行操作。ROS-Glo™H₂O₂底物可以在处理过程中或在处理孵化期结束时添加到测定井中,在试剂添加后不到2小时内即可记录数据。

在96孔和384孔板格式中执行酶或细胞分析

培养细胞中ROS的诱导

用ROS- glo™H₂O₂测定法检测到,Menadione处理K562细胞导致浓度依赖性ROS增加。该试验可以在各种含或不含血清的细胞培养基中进行,不需要在进行试验前将培养基从培养的细胞中移除。

NADH氧化酶酶活性

NADH氧化酶的酶活性是通过在酶反应缓冲液中与NADH孵育不断增加的NADH氧化酶浓度,并用ROS-Glo™H₂O₂测定法测定产生的H₂O₂来确定的。在适当水平的NADH氧化酶和NADH底物被确定后,该方法被用于通过寻找发光减弱来确定化学库中该酶的抑制剂。

多重细胞毒性试验,每孔数据更翔实

HepG2细胞分别用产生ros的化合物(甲萘醌或邻苯三酚)或细胞毒性诱导试剂(洋地黄苷)处理,并在37℃下培养2小时。在给药时添加CellTox™绿色染料(膜不渗透DNA结合染料作为细胞毒性指标)和H₂O₂底物。孵育后测量来自CellTox™绿色染料的荧光,然后加入ROS-Glo™检测溶液。在孵育20分钟后测量ROS-Glo™测定法的发光信号。

猫。# G8820包含足够的试剂,在96孔板中100 μ l/试验,或在384孔板格式中25 μ l/试验400次。猫。# G8821包含足够的试剂在96孔板100 μ l/试验中进行500次试验或在384孔板格式的25 μ l/试验中进行2000次试验。

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2O2 Assay ","Modal":true}" data-reactroot=""> ROS-Glo™H2O2分析PDF561KB- - - - - -英语

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荧光素检测试剂

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H2O2底物稀释缓冲

G922B 1×10毫升

d半胱氨酸,100 x

V251B 1×500μl

荧光素检测试剂

V859B 1 × 1

调整缓冲区

V865B 1×50毫升

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