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激酶活性测定介绍
激酶是生物化学和医学研究中最重要和被广泛研究的酶家族之一。激酶催化磷酸从ATP转移到各种各样的细胞底物。许多细胞过程,如细胞信号、细胞分裂和生长、发育、分化和细胞死亡都是由激酶协调的。在正常生理条件下,激酶的调控是严格的。然而,在病理条件下,激酶活性可能会失调,由这些酶控制的细胞内信号网络的破坏会导致包括癌症和炎症在内的许多疾病。因此,激酶已成为药物开发的重要靶点。
鉴于激酶抑制剂作为潜在疗法的重要性,研究人员已经开始依赖于监测激酶活性变化的技术以及小分子抑制剂对其的调节。基于同位素的测定激酶活性的方法一直被认为是金标准。但是,由于安全问题和废物管理问题,已寻求其他办法。理想的激酶测定方法具有以下属性:
- 通用
- 衬底独立
- 可伸缩的
- 检测低底物转化率下的活性
- 大动态范围
- 较低的假阳性结果
考虑到这些目标,我们开发了一种基于发光的ADP检测方法,ADP- glo™激酶检测,通过量化激酶反应中产生的ADP的数量来测量激酶活性。结合我们的激酶酶系统,Promega提供了一个最广泛的阵列完整的生化激酶活性测定。