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激酶靶点接合

NanoBRET™靶点接合(TE)细胞内激酶检测基于NanoBRET™系统,这是一种能量转移技术,旨在测量活细胞中的分子接近性。NanoBRET™TE Assay通过竞争性置换可穿透细胞的荧光NanoBRET™示踪剂来测量测试化合物的表观细胞亲和力,该示踪剂可逆地结合到细胞中的NanoLuc®荧光素酶-激酶融合物上。

Promega NanoBRET™TE激酶测定和特异性激酶nanoluc®荧光素酶融合载体一起用于测量激酶化合物在活细胞中的亲和力、占用和停留时间。超过100个激酶特异性的分析方法是现成的,有代表性的数据可用。分析使用简单的多孔板格式,可扩展,并产生定量结果。

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激酶检测

TE激酶载体

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目标交战分析介绍

确定一个小分子与活细胞内的目标蛋白结合形成了目标接合测定的基础。这是药物发现的重要一步,因为它可以与化合物的功能疗效进行关联,并有助于确定化合物的作用方式。此外,靶点接合测定在高度特异性化学探针的开发中发挥着核心作用,这些探针作为有价值的研究工具,可以帮助揭示靶蛋白在复杂生物系统中的作用。

许多现有的监测蛋白质-小分子结合相互作用的方法在生化分析中使用纯化的蛋白质,但这些生化分析的结果可能不能准确地反映蛋白质-小分子在活细胞中的结合。因此,对定量细胞目标交战方法的需求越来越大。

文献中指出,高价值的细胞靶标接合方法可以(1)定量小分子与靶蛋白的直接结合;(2)定量小分子对目标的占用或结合程度;(3)使用活细胞,而不是裂解物进行这些测量。Promega NanoBRET™目标交战技术具有这些有价值的属性。