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克隆与DNA标记

修饰核酸的工具为亚克隆等许多分子生物leyu体育靠谱吗学技术提供了基础。对于传统的DNA片段克隆,我们提供了多种限制性内切酶和T4 DNA连接酶。对于细菌转化,我们提供了一个选择的能力细胞,包括我们独特的单步KRX菌株。

对于其他克隆应用,我们提供T4 DNA激酶,小牛碱性磷酸酶和其他修饰酶。对于RNA转录,T7, SP6和T3 RNA聚合酶可用。

各种各样的DNA/RNA标记,包括工作台和阶梯梯子,使确认实验成功。

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克隆与DNA标记导论“,

亚克隆是分子生物学中的一个基本过程,用于将插入物从一个载体移动到另一个载体,以获得所需的功能和对感兴趣的DNA序列进行表征。

完成DNA插入物转移的一种方法是使用限制性内切酶来消化片段和目标载体(通常是质粒)。通过比较消化样品的预期大小和DNA标记片段来确认消化成功。这是通过在琼脂糖凝胶上运行样本,按大小分离DNA片段来实现的。然后使用T4 DNA连接酶将所需的片段“粘贴”到消化的质粒中。

下一步是转型。细菌与质粒的转化是重要的,因为细菌被用作储存和复制质粒的手段。大肠杆菌如果细胞壁发生改变,使DNA更容易通过,细胞就更有可能吸收外来DNA。这样的细胞据说是有能力的。对成功转化的细胞的选择是通过对感兴趣的质粒的抗生素选择来完成的。

有许多方法可以确认转移是否成功,包括PCR、限制性内切酶消化或测序。一旦确认,重组载体可用于多种应用,如蛋白质表达或RNA转录。