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胆固醇/胆固醇Ester-Glo™试验

从各种生物样品中检测胆固醇

  • 适用于溶解的细胞,组织,培养基和血清样本
  • 不需要有机提取,极端高温或离心
  • 线性胆固醇检测可达80 μ M

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胆固醇/胆固醇Ester-Glo™试验
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从各种样品中敏感、快速检测胆固醇和胆固醇酯

胆固醇/胆固醇酯- glo™检测是一种快速、灵敏的生物荧光检测方法,用于测量培养的细胞裂解物和其他生物样品(如脂蛋白组分、细胞培养基、血清和组织匀浆)中的胆固醇和胆固醇酯。胆固醇是一种重要的脂类,参与类固醇生成、胆汁酸合成、细胞信号传导和膜结构的维持。

化验是如何工作的

胆固醇/胆固醇酯- glo™检测使用一种胆固醇脱氢酶来测量胆固醇,该脱氢酶将胆固醇的存在与NADH的产生和prolucifin的激活联系起来,prolucifin通过荧光素酶产生光。在NADH存在的情况下,Reductase通过酶的作用将prolucifin Reductase底物还原为lucifin。在使用Ultra-Glo™荧光素酶和ATP的荧光素酶反应中检测荧光素,产生的光量与样品中胆固醇的量成正比。

为了测量胆固醇酯,该测定方法包括一种胆固醇酯酶,它将从胆固醇酯中除去脂肪酸,在每一分子酯中产生一分子胆固醇。胆固醇酯的含量是根据在没有酯酶时(游离胆固醇)和存在酯酶时(总胆固醇)所测得的胆固醇的差异来确定的。

图表显示如何检测胆固醇和胆固醇酯与胆固醇-glo试验。

简单的协议兼容不同的样本类型

小鼠肝脏组织中胆固醇的检测

将小鼠肝脏组织均质,用裂解液稀释。在稀释样品中加入10μM的胆固醇标准峰,然后测定所有样品和标准品的游离胆固醇。标准物与本底物之间的变化与样品+标准物与样品之间的变化相同,说明组织匀浆不干扰胆固醇标准物的定量。

用胆固醇突钉检测小鼠肝脏中的胆固醇。

人脂蛋白中胆固醇的检测

用Cholesterol-glo法检测人脂蛋白中的胆固醇。
测定购买的人高密度和低密度脂蛋白的总胆固醇(样品+酯酶)和游离胆固醇。浓度计算采用40μM胆固醇标准。相对光单位(RLU)值(以百万为单位)列在每条的顶部。

不同比例的脂蛋白含有不同数量的胆固醇和胆固醇酯。胆固醇检测试验可用于量化总胆固醇水平,游离胆固醇水平和计算胆固醇酯水平作为两者之间的差值。

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胆固醇的溶解的解决方案

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胆固醇酯酶

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胆固醇标准

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仅供研究用途。不用于诊断程序。

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还原酶底物

G885B 2×275μl

胆固醇的溶解的解决方案

J319B 1×100毫升

胆固醇检测解决方案

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胆固醇酯酶

J321B 1×500μl

胆固醇标准

J322A 1×500μl 20毫米

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使用限制

仅供研究用途。不用于诊断程序。

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