甘油三酯- glo™试验| - 乐鱼电竞-官网,leyu乐鱼网

生物样品中甘油三酯的快速、灵敏检测

甘油三酯- glo™检测是一种生物荧光检测方法，用于快速、灵敏地测定培养细胞裂解液和其他生物样品中的甘油三酯，如细胞培养基、血清和组织匀浆。该检测方法非常适合测量正常和病理条件下甘油三酯的积累和清除。例子包括脂肪细胞、肝脏样本或细胞培养的肝脏模型，其中过量的甘油三酯积累会导致脂肪变性，这是非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的早期标志。

化验是如何工作的

甘油三酯- glo™检测通过测量从酶释放的甘油来检测甘油三酯水平与脂肪酶反应:1摩尔甘油/ 1摩尔甘油三酯。甘油是用耦合反应法测定的它将NADH的产生与荧光素酶产生光的促荧光素的激活联系起来。的甘油三酯的量是根据无甘油(游离甘油)和无甘油时测定的甘油的差异来确定的脂肪酶的存在(总甘油)。脂肪酶将甘油三酯(TAG)转化为甘油。甘油激酶和甘油-3-磷酸脱氢酶被用来产生NADH。在NADH存在的情况下，Reductase通过酶的作用将prolucifin Reductase底物还原为lucifin。在使用Ultra-Glo™荧光素酶和ATP的荧光素酶反应中检测荧光素，产生的光量与样品中甘油的量成正比。

简单的协议兼容不同的样本类型

不需要有机提取

从3T3L1-MBX成纤维细胞中分化出来的脂肪细胞在使用或不使用有机提取方法和甘油三酯- glo™检测的情况下进行测量。其中一组井用甲醇提取，转移到一个玻璃小瓶中，让它一夜之间蒸发到干燥。

另一组井未进行有机萃取。然后用裂解液提取两种样品，测量甘油三酯水平。在6次重复中，未进行有机提取的甘油三酯回收率较高，变化较小。

人肝组织中的甘油三酯水平

量化肝细胞中的甘油三酯水平用于肝脏疾病的研究，如非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。在这里，人类肝组织被用来模拟肝细胞的脂肪变性和定量甘油三酯水平。

3D InSight™人类肝脏微组织(MT, InSphero，约1150个细胞/孔)在无血清培养基中孵育3天和10天，无血清培养基中含有生理(LG/LI)或生理上(LG/HI)水平的葡萄糖和胰岛素，并补充与BSA (FFA)结合的游离脂肪酸或低密度脂蛋白血浆组分(LDL)。微组织在PBS中洗涤两次，并根据标准方案测定总甘油含量，因为细胞内甘油含量对总甘油含量没有显著贡献。数值绘制为每MT甘油三酯浓度。数据由瑞士苏黎世InSphero公司提供。

定量分化脂肪细胞中的甘油三酯水平

用油红O染色法和甘油三酯- glo™法监测分化脂肪细胞中的脂质积累情况。3T3L1-MBX成纤维细胞平行板按照标准方案进行分化。

在第5、12、14和21天(分别为A-D面板)，平行平板要么用油红O染色，要么用甘油三酯- glo™测定法测定总甘油含量。甘油三酯- glo™定量测量分化脂肪细胞中的甘油三酯水平。

简单的样品制备方案只包括一个洗涤剂裂解步骤和甘油三酯定量前的样品稀释。不需要有机提取或极端加热步骤。

协议

完整的协议

甘油三酯- glo™检测技术手册PDF（2468KB)- - - - - -英语

快速的协议

Triglyceride-Glo FB229PDF（133KB)- - - - - -英语

盒子里是什么?

项	部分#	大小	浓度
还原酶底物	G885A	1×55μl
丙三醇溶菌作用的解决方案	J315A	1×10毫升
动能增强剂	J316A	1×50μl
甘油检测解决方案	J317A	1×5毫升
脂蛋白脂肪酶	J318A	1×400μl
甘油标准	J324A	1×500μl	20毫米

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