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葡萄糖代谢是许多生物体内的一个关键过程。胰岛素刺激的葡萄糖摄取不足与2型糖尿病有关,而高葡萄糖摄取是与癌症相关的高糖酵解率的标志。测量葡萄糖的摄入量可以确定各种治疗糖尿病和癌症的效果。
测定葡萄糖摄取的金标准方法依赖于检测放射性标记的葡萄糖类似物。替代的比色法和荧光法葡萄糖摄取测定法往往缺乏可靠测量细胞中葡萄糖摄取所需的灵敏度和稳健性。
葡萄糖吸收glo™检测是一种基于平板的均匀生物发光方法,基于2-脱氧葡萄糖-6-磷酸(2DG6P)检测,用于测量细胞中的葡萄糖吸收。
“Promega的leyu乐鱼网产品很可靠,可以毫不犹豫地购买。我的实验非常顺利,正如预期的那样,我们有更多的计划,使用葡萄糖吸收- glo™检测进行吸收实验。”
2-脱氧葡萄糖(2DG)被运输到细胞内并被磷酸化产生2-脱氧葡萄糖-6-磷酸(2DG6P)。Stop Buffer的加入可以阻止2DG的运输,溶解细胞,破坏细胞内的NADPH并使蛋白质失活。在加入2DG6P检测试剂之前,加入中和缓冲液使溶液中和。试剂内的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)将2DG6P氧化为6-磷酸脱氧葡萄糖酸盐(6PDG),将NADP+还原为NADPH。还原酶利用NADPH将原萤光素转化为萤光素,然后萤光素酶利用原萤光素产生光。
在癌症模型中,当细胞缺氧时,缺氧条件将细胞代谢从氧化磷酸化转变为糖酵解。这就导致了葡萄糖摄取的增加。
在缺氧(1%氧气)条件下生长的MCF7细胞显示葡萄糖吸收- glo™增加,表明糖酵解速率增加。使用RealTime-Glo™和CellTiter-Fluor™检测结果显示,同样的细胞活力没有显著变化。
使用脂肪细胞模型,我们证明了3T3L1-MBX脂肪细胞葡萄糖摄取的变化对细胞健康没有显著影响。将RealTime-Glo™检测与葡萄糖摄取- glo™检测相结合,将葡萄糖摄取的直接影响与对细胞健康的整体影响分离开来。
当脂肪细胞在各种条件下处理时,葡萄糖吸收- glo™检测的结果,其中“None”表示葡萄糖摄取的基础水平。胰岛素诱导葡萄糖转运体向细胞表面转移,从而增加葡萄糖摄取高于基础水平。细胞松弛素B是一种葡萄糖转运蛋白抑制剂,可降低葡萄糖的摄取。LY294002是一种磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂,是一种必需的胰岛素信号转导酶,与单独的胰岛素相比,它能减少葡萄糖的摄取。
当脂肪细胞在各种条件下处理时,RealTime-Glo™检测的结果,其中“None”表示葡萄糖摄取的基础水平。尽管葡萄糖摄取有显著的变化,如伴随的面板所示,但根据RealTime-Glo™测定,生存能力有最小的变化。
荧光素酶试剂
挡车器
中和缓冲
辅酶ii +
G6PDH
2 dg
2 dg6p标准
还原酶
还原酶底物
按地段编号查册
美国帕特。编号9,273,343和9,951,372,欧洲派。2751089号,日本派。6067019号及其他未决专利。
在机械亲和性基质上培养的心肌细胞,而不是在传统培养设备上培养的心肌细胞,由于活性氧和高糖条件下的胰岛素抵抗,表现出明显的线粒体功能障碍。
生物发光检测快速检测乳酸从各种样品类型。
J5021, J5022
通过测量与脂肪酶的酶促反应释放的甘油来检测甘油三酯水平。
J3160, J3161
定量测量胰高血糖素从细胞培养或胰岛分泌物样本使用快速,简单的免洗协议。
W8020, W8022
用可扩展的免清洗方案检测细胞培养样品中的胰岛素或胰高血糖素。
用于检测发光、荧光和吸光度的高性能微板读取器。
GM3000
敏感的,生物发光的测定,测量H2O2在细胞培养。
G8820, G8821
均匀试验定量总谷胱甘肽和谷胱甘肽比率。
V6611, V6612
一种预测潜在线粒体功能障碍的有效分析方法。
G8000, G8001
让我们来寻找符合您需求的产品。
罗伯特。
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