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用Lumit™免疫测定法检测代谢调节剂

Lumit™胰岛素和胰高糖素免疫测定均为均匀的生物荧光ELISA替代品,可用于从胰岛和培养细胞中测量胰岛素和胰高血糖素。这种化验提供了一种快速、简单、无需清洗的方案。只需将Lumit™试剂添加到样品中,使用标准多模平板阅读器进行孵育和阅读。结果在一个多小时内就会出来,所以你可以更快地计划你的下一个实验。Lumit™检测是定量胰岛浸润工作流程中的激素分泌的理想方法。灵活的分析格式可以扩展到384孔板,用于高通量样品处理。

产品可用性

Lumit™胰高血糖素免疫分析法可通过我们的目录获得。

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Lumit™胰岛素免疫分析法可作为早期访问材料。联系我们的一个可用的套件和订购信息的当前列表。

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Lumit™免疫分析法是如何工作的

根据特异性和敏感性选择分析物的一抗,用NanoBiT®荧光素酶的LgBiT和SmBiT亚基标记。在分析物存在的情况下,亚基被聚集在一起以重建活性荧光素酶。添加优化的荧光素酶底物产生与分析物水平成正比的明亮发光信号。整个免疫分析在70分钟内完成。

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光度测定工作流程。

在这篇文章中,Tong和Stein使用Lumit™胰岛素免疫分析法来研究脂滴形成对胰岛细胞的影响。

Tong, X.和Stein, R.(2021)脂滴保护人类β细胞免受脂毒诱导的应激和细胞特性改变。糖尿病70, 2595 - 607。

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在这项研究中,El和同事使用Lumit™胰高血糖素免疫分析法来描述控制α细胞分泌胰高血糖素的复杂调节机制。

El, K。et al。(2021) GIP通过对α细胞和β细胞的双重作用介导肠促胰岛素效应和葡萄糖耐量。科学。睡觉。7, abf1948。

查看数据 阅读更多关于这项工作

好处

  • 可扩展和高吞吐量:在96井或384井板中进行低容量测定;不需要预涂板。
  • 没有洗:简单的添加-混合-读取协议。
  • 见效快:开始试验70分钟后即可得到结果。
  • 线性范围大:皮摩尔到纳摩尔的线性范围涵盖了大多数细胞模型的预期浓度。
  • 发光检测:使用标准版读光度计;不需要专门的仪器或模块。

使用Lumit™免疫分析法检测激素分泌

胰岛素和胰高血糖素是代谢研究中测量的关键目标分析物,包括糖尿病而且肝病研究.这两种激素分别由胰岛β细胞和α细胞分泌,对调节体内葡萄糖水平至关重要。

使用Lumit™免疫测定法,可以很容易地从培养中的单层细胞、3D胰岛微组织和胰岛中收集激素分泌数据。简单的添加-读取协议兼容静态和动态葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)实验,包括渗透系统。

定量胰岛素-1细胞分泌的胰岛素

柱状图显示葡萄糖刺激胰岛素分泌在胰岛素-1细胞中随着葡萄糖浓度的增加和细胞密度的变化。
柱状图显示随着葡萄糖浓度的增加,INS-1细胞中胰岛素的释放增加。

用Lumit™免疫分析法监测细胞胰岛素分泌对葡萄糖的响应。面板。在96孔板的不同细胞/孔中重复镀上INS-1细胞用于葡萄糖刺激胰岛素分泌实验。60分钟后,取10µl的上清液,用Lumit™胰岛素免疫分析法测定384孔板。误差条为+/ -1 s.d。面板B。使用10000个细胞/孔的相同实验数据显示,胰岛素的释放随着葡萄糖浓度的增加而增加。

小鼠胰岛胰岛素和胰高血糖素分泌的定量研究

代表性的灌注数据显示小鼠胰岛分泌胰岛素和胰高血糖素。

在灌注实验中采集的样本中测量胰岛素和胰高血糖素的分泌。简单地,80个小鼠胰岛被放置在渗透仪器(Biorep, Miami Lakes, Florida)的三个重复室中。分别用2.7mM葡萄糖和10mM葡萄糖和氨基酸混合物处理胰岛。每分钟都要收集百泡水。每个样品10微升被转移到一个384孔板的孔中,并检测胰岛素或胰高血糖素。胰岛素和胰高血糖素数据集叠加。这些数据是由博士们提供的。汉娜·福斯特和马修·梅林斯,威斯康辛州麦迪逊的威斯康辛大学退伍军人医院。