荧光素酶检测

当研究报告基因时，更容易理解启动子或反应元件如何控制基因表达。荧光素酶非常适合用于报告分析，具有简单的基于光的检测和高灵敏度，甚至可以量化表达的微小变化。虽然报告分析通常用于评估启动子活性的变化，但它们也可以用于研究信号转导、蛋白质功能、miRNA调控，甚至实时测量生物体中的过程。

报告分析的基础是携带报告基因的载体和提供底物的检测试剂，以将荧光素酶酶的活性转化为光信号。双荧光素酶检测试剂在读取第二报告信号之前淬灭第一报告信号，以便从同一样品中依次测量两个报告信号。第二个报告者通常作为内部控制，以获得更准确的数据。

一旦选择报告载体并克隆任何元件(如果需要)，将载体引入培养细胞，通常使用基于转染的方法，用溶解(终点)试剂或活细胞试剂检测表达和活性，以测量同一细胞随时间的变化。荧光素酶报告检测可与其他检测方法混合用于评估细胞凋亡、代谢等。荧光素酶测定的测量通常使用平板光度计进行。