荧光素酶检测

研究报告基因时，更容易理解启动子或反应元件如何控制基因表达。荧光素酶非常适合于报告基因分析，具有简单的基于光的检测和高灵敏度，可以量化表达的微小变化。虽然报告基因检测通常用于评估启动子活性的变化，但它们也可用于研究生物体的信号转导、蛋白质功能、miRNA调控甚至实时测量过程。

报告基因检测的基础是载体，载体携带报告基因，检测试剂提供底物，将荧光素酶的活性转化为光信号。双荧光素酶检测试剂在读取第二个报告基因信号之前先灭掉第一个报告基因信号，以便从同一样品中依次测量两个报告基因。第二个报告者通常被包括作为更准确的数据的内部控制。

一旦选择了报告载体并克隆了其中的任何元素(如果需要)，就将该载体引入培养细胞中，通常使用基于转染的方法，用裂解(终点)试剂或活细胞试剂进行表达和活性检测，以测量同一细胞随时间的变化。荧光素酶报告试验可以与其他试验混合使用，以评估细胞凋亡、代谢等。荧光素酶测定的测量通常使用基于板的光度计进行。