遗传报告载体与细胞系
我们提供荧光素酶报告载体，包含NanoLuc®，firefly和Renilla报告基因。这些包括用于克隆您感兴趣的调控区域的无启动子载体，编码短半衰期报告基因的构建物，用于对转录水平的变化做出更直接的反应，以及用于创建蛋白质报告基因融合的载体。此外，还有预先设计了响应元件的萤火虫荧光素酶载体，用于研究特定的信号通路，以及巧合报告基因，其中两个报告基因从一个转录本中表达。pGL4载体表达萤火虫和Renilla报告基因和被优化以最大化表达，最小化脱靶反应和快速响应转录动力学。pNL Vector系列基于pGL4主干，并提供表达NanoLuc®报告基因的选项。
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报告基因载体基础
报告基因的传统用途是分析基因表达和剖析顺式作用的遗传元件如启动子和增强子的功能。然而，基因表达的更广泛方面需要的不仅仅是转录，报告基因也可以用于研究其他细胞事件，如miRNA调节。报告载体的特征将取决于预期的应用，通常包括报告基因的一种形式，上游元件，如启动子或响应元件，以及通常允许稳定细胞系生成的可选择标记。
天然萤火虫荧光素酶作为一种遗传报告基因受到广泛欢迎，这是由于酶分析的敏感性和方便性，以及蛋白质合成与酶活性的紧密耦合。萤火虫荧光素酶，是由卢克基因是不需要任何翻译后修饰的单体;它是一种成熟的酶，可直接翻译其mRNA。Luc2是一种改进的萤火虫荧光素酶基因，已被密码子优化，以改善在哺乳动物细胞中的表达。
NanoLuc®荧光素酶是一种基于深海虾荧光素酶的小单体酶(19.1kDa, 171个氨基酸)Oplophorus gracilirostris。这种工程酶使用一种新的底物furimazine，在不依赖atp的反应中产生高强度的发光型发光。与其他形式的荧光素酶不同，NanoLuc®荧光素酶非常适合标准(裂解)，基于分泌和活细胞(非裂解)报告基因应用。小尺寸的基因(513bp)和编码的蛋白质是理想的病毒应用和蛋白质融合。
Renilla荧光素酶是一种36kDa的单体酶，可催化胶肠嗪氧化生成胶肠酰胺和480nm蓝光。的hRluc基因已经被设计去除了大多数的隐转录因子结合位点，并通过密码子优化改善哺乳动物的表达。作为报告分子，Renilla荧光素酶通常被用作萤火虫荧光素酶双报告基因测定中的标准化对照，也可以用作活细胞报告基因。
