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核受体分析荧光素酶载体

利用识别序列或单杂交分析结合核受体的载体

  • 使用pFN26 (BIND)创建绑定域融合hRluc-neo Flexi®Vector和pGL4.35[luc2P/ 9 xGAL4无人机/ Hygro]向量
  • 小鼠乳腺肿瘤病毒pGL4.36长端重复序列[luc2PVector评估雄激素或糖皮质激素反应
  • 雌激素受体配体结合域(pBIND-Er∝)和糖皮质激素受体配体结合域(pBIND-GR)已经克隆

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核受体分析荧光素酶载体
pGL4.36与MMTV/20µg
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核受体分析可以用传统的方法进行,使用带有核受体反应元件的最小启动子载体。或者,你可以使用病毒元件,如小鼠乳腺肿瘤病毒长端重复启动子pGL4.36[luc2P/MMTV/Hygro]判断雄激素或糖皮质激素反应的载体。在许多情况下,使用这些方法需要一个具有适当内源性核受体的细胞系,这意味着每个核受体研究可能需要不同的细胞系。然而,一种使用酵母双杂交系统原理的方法适用于核受体工作。pFN26A中的核受体配体结合域与GAL4 DNA结合域融合(BIND)hRluc-neo Flexi®载体,共转染pGL4.35[luc2P/ 9 xGAL4UAS/Hygro]载体,一种萤火虫荧光素酶报告载体,包含最小启动子上游GAL4激活序列的重复。配体结合域负责配体结合、同型或异型二聚以及与辅激活剂或辅抑制剂的相互作用。单杂交方法允许您使用任何细胞系和核受体。两个包含雌激素受体配体结合域(pBIND-ERα)和糖皮质激素受体配体结合域(pBIND-GR)的pFN26A载体可用于单杂交方法。

基于GAL4的系统去除来自内源性受体的背景信号,优化的9X GAL4 UAS以更好的信噪比改善了细胞反应。结合Renilla/新霉素标记可通过双荧光素酶®检测或使用可选标记生成稳定细胞系,所有均使用一个载体。这种单一杂交试验意味着你可以用一个单一的实验系统比较或分析所有核受体。失稳和优化luc2P荧光素酶基因在报告分析中提供了更高的灵敏度和更短的诱导时间。

应用程序

  • 发现核受体配体和调节剂。
  • 药物发现/高温超导。
  • 癌症研究。
  • 炎症的研究。
  • 环境毒理学。

参考

  1. 埃文斯,R.M.(1988)类固醇和甲状腺激素受体超家族。科学240, 889 - 95。
8977年ma_300px

序列信息

pFN26A(绑定)hRluc-neo Flexi®Vector GenBank®登录号GQ229578和向量序列文本文件

pBIND-ERα Vector GenBank®登录号GQ229579和向量序列文本文件

pBIND-GR Vector GenBank®登录号GQ229580和向量序列文本文件

pGL4.35 [luc2P/ 9 xGAL4UAS/Hygro] Vector GenBank®登录号GQ229577和向量序列文本文件

pGL4.36 [luc2P/MMTV/Hygro] Vector GenBank®登录号FJ773214和向量序列文本文件

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研究人员只能将本产品用于研究用途,不得用于商业用途。“商业用途”指一方为金钱或其他对价而对本产品及其衍生品的任何和所有使用,可包括但不限于以下用途:(1)产品制造;(二)提供服务、信息或者数据;和/或转售产品或其衍生品,无论该产品或衍生品是否转售用于研究。研究人员无权修改或以其他方式创造荧光素酶基因核苷酸序列的变体,但研究人员可以:(1)创建融合基因序列,条件是所得荧光素酶基因的编码序列与完整的荧光素酶基因序列相比,在受影响的末端缺失的脱氧核苷酸不超过4个;(2)在拼接研究中根据编码荧光素酶的发光失活或重建预测插入和删除核酸序列。leyu体育靠谱吗未经Promega事先明确书面同意,不得擅自使用或转让本产品或衍生产品。此外,研究人员必须:(1)使用从Promega购买的发光检测试剂对本产品及其衍生物的发光活性进行所有测定;或(2)联系Promega获得使用本产品及其衍生产品的许可。研究人员可以将衍生品转让给他人用于研究用途,前提是在转让时将本标签许可的副本提供给接受者,而接受者同意受本标签许可条款的约束。 With respect to any uses outside this label license, including any diagnostic, therapeutic or prophylactic uses, please contact Promega for supply and licensing information. PROMEGA MAKES NO REPRESENTATIONS OR WARRANTIES OF ANY KIND, EITHER EXPRESSED OR IMPLIED, INCLUDING FOR MERCHANTABILITY OR FITNESS FOR A PARTICULAR PURPOSE WITH REGARDS TO THE PRODUCT. The terms of this label license shall be governed under the laws of the State of Wisconsin, USA. This label license relates to Promega patents and/or patent applications on improvements to the luciferase gene.

美国帕特。8008006号。

美国帕特。7728118号。

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美国帕特。编号8,293,503,9,018,014和8,367,403,欧洲派。第1685247号等专利及未决专利。

专利申请中。

美国帕特。8008006号。

美国帕特。No. 7,906,282和欧洲派特。没有。1341808。

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