胰蛋白酶
胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,专门裂解赖氨酸和精氨酸残基的羧基侧。胰蛋白酶的严格特异性对蛋白质鉴定至关重要,它已成为霰弹枪蛋白质组学中蛋白质消化多肽的金标准。
Trypsin Platinum,质谱级,是一种重组蛋白酶,专为用户寻找精确的蛋白质定性质谱和反相高效液相色谱-紫外。测序级修饰的胰蛋白酶和质谱级的胰蛋白酶金,已经通过还原甲基化修饰,产生了一种高度活跃和稳定的分子,非常耐自溶消化。经TPCK处理后,纯化胰蛋白酶的特异性进一步提高,使糜蛋白酶失活。
此外,我们还提供一系列设计用于特定应用的胰蛋白酶配方,包括用于自旋柱消化的固定化胰蛋白酶,用于缩短蛋白质水解反应时间的快速消化胰蛋白酶,以及用于蛋白质水解抗性蛋白消化的胰蛋白酶/赖氨酸C Mix。
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测序级胰蛋白酶和金级胰蛋白酶 | 胰蛋白酶/ Lys-C | 快速胰蛋白酶&快速胰蛋白酶/ lysc | 阿卡普低pH值消化试剂盒 | 胰蛋白酶铂 | |
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建议应用程序 | •一般蛋白质组学 •凝胶消化 |
•困难的蛋白质 •定量 |
•快速结果 •高吞吐量/自动化 |
•肽图 •减少工件 |
•肽图 •最高特异性 |
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Promega胰蛋白酶配方介绍
胰蛋白酶具有较高的蛋白水解活性和解理特异性,是质谱样品制备中应用最广泛的蛋白酶。Promega优质胰蛋白酶来源于猪胰蛋白酶,经过修饰后具有最高的蛋白水解活性和切割特异性。
测序级修饰胰蛋白酶
在成千上万的论文中引用,测序级修饰胰蛋白酶已被制造,以提供最大的特异性。本品可分成20μg或100μg等份的冻干产品,也可制成50mM醋酸冻液。提供再悬浮缓冲,使用方便。
胰酶金和胰酶铂
胰蛋白酶金具有最大的消化特异性和极强的自溶消化抗性。本品适用于凝胶内消化和溶液内消化,含100μg冻干等分物。它通过质谱法进行了额外的质量控制,以确保应用/仪器兼容性。
Trypsin Platinum是一种重组蛋白酶,专为使用质谱和反相高效液相色谱-紫外技术寻找精确蛋白质表征的用户设计。它不存在任何可检测到的非特异性蛋白水解活性。一种新的化学修饰方法保证了最大的自蛋白水解抗性。胰酶铂具有高的蛋白水解效率,并且不含动物来源的污染蛋白。
固定化胰蛋白酶
固定化胰蛋白酶为消化一系列浓度的纯化蛋白质或复杂蛋白质混合物提供了一种快速和方便的方法。消化在一个旋转柱中发生,只需30分钟,消化的肽很容易从固定化胰蛋白酶中分离出来,因为它们流经收集管。可调节的协议很容易适应不同的蛋白质浓度,没有摇晃或水浴是必要的。
Trypsin/ lysc Mix,质谱级
传统上,胰蛋白酶和lysc蛋白酶被联合使用来消化蛋白质水解抗性蛋白。Trypsin/ lyss - c Mix是Trypsin Gold(质谱级)和rlyss - c(质谱级)的独特混合物,设计用于在标准消化条件下单独使用胰蛋白酶改善蛋白质或蛋白质混合物的溶解,增加肽回收率,从而获得更好的蛋白质定量。
由于构象紧密,许多蛋白质对胰蛋白酶有抗性,尽管蛋白质变性使蛋白质水解,但在这些条件下胰蛋白酶是不活跃的。胰蛋白酶/ lysc混合物克服了这一障碍,因为它即使在强变性条件下仍保持活性,并对胰蛋白酶抑制污染物耐受,使即使是蛋白水解抗性蛋白也能消化。
快速消化-胰蛋白酶和快速消化-胰蛋白酶/ lysc试剂盒
胰蛋白酶消化的一个缺点是样品制备时间长,从四小时到一夜不等。要实现有效的消化,首先需要用表面活性剂或变性剂展开蛋白质底物,如尿素或胍。然而,这些化学物质可能有负面的副作用,通常必须在分析之前去除。为了缩短制备LC-MS分析样品所需的时间,我们开发了一种优化的协议,在该协议中,快速和有效的消化可以很容易地以最小的协议步骤实现。
快速消化-胰蛋白酶和快速消化-胰蛋白酶/ lyss -C试剂盒通过在70°C下的蛋白质消化,可显著缩短蛋白质水解反应时间。这种简单易用的方法快速、高效、灵活,适用于大范围的样品量和蛋白质浓度。消化完全使用溶液内方法实现;由于酶没有固定在微珠上,该协议没有对快速摇动和离线过滤去除微珠的严格要求。不需要化学变性剂,特殊的实验室设备或离线脱盐,因此下游LC-MS的样品清理是不必要的,从而缩短了制备时间,减少了样品损失。