市售的蛋白质组和质谱级胰蛋白酶产品含有低但可检测的非特异性蛋白酶活性。leyu乐鱼网对这种活性的仔细分析表明,它本质上是糜蛋白酶。如果消化反应中使用了大量的胰蛋白酶,非特异性的、胰糜蛋白酶样的裂解活性就会变得明显(图1,图a)。这些非特异性的裂解活性会影响蛋白质分析的质量。我们的生产程序确保胰蛋白酶铂没有任何可检测到的非特异性裂解活性痕迹(图1,面板B)。
自体蛋白水解是胰蛋白酶消化的另一常见副作用。为了抑制胰蛋白酶自身蛋白水解,对用于蛋白质质谱样品制备的胰蛋白酶进行了化学修饰。然而,仍能观察到一定程度的自身蛋白水解(图2,图a)。产生的胰蛋白酶自身蛋白水解肽通常会影响蛋白质分析,特别是在消化反应中使用大量胰蛋白酶时。与目前可用的蛋白质组学和质谱级胰蛋白酶产品中观察到的自身蛋白水解相比,我们的新修饰方法进一步抑制了胰蛋白酶铂的自身蛋白水解(图2,面板B),确保即使使用大量胰蛋白酶铂,自身蛋白水解胰蛋白酶肽的水平仍然可以忽略。leyu乐鱼网