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胰蛋白酶白金,质谱级

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重组胰蛋白酶用于最精确的生物治疗蛋白表征和专门的蛋白质组学应用

  • 在蛋白质组和质谱级胰蛋白酶中通常观察到无凝乳蛋白酶活性
  • 抗自身蛋白水解能力强
  • 适用于任何现有的胰蛋白酶协议
  • 优秀的批次对批次的重现性
  • 不含污染动物蛋白

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胰蛋白酶白金,质谱级
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质谱和反相高效液相色谱-紫外准确的蛋白质表征

Trypsin Platinum,质谱级,是一种重组蛋白酶,设计用于精确的蛋白质表征质谱和反相高效液相色谱与紫外检测(RP-HPLC-UV)。它没有任何可检测到的非特异性蛋白水解活性。一种新的化学修饰方法确保最大的自蛋白水解抗性。胰蛋白酶铂具有很高的蛋白质水解效率,并且不污染动物来源的蛋白质。

了解更多关于胰蛋白酶铂在网络研讨会“生物治疗蛋白特性:克服非特异性切割和自身蛋白水解的挑战”。

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解理特异性和自蛋白水解抗性

市售的蛋白质组和质谱级胰蛋白酶产品含有低但可检测的非特异性蛋白酶活性。leyu乐鱼网对这种活性的仔细分析表明,它本质上是糜蛋白酶。如果消化反应中使用了大量的胰蛋白酶,非特异性的、胰糜蛋白酶样的裂解活性就会变得明显(图1,图a)。这些非特异性的裂解活性会影响蛋白质分析的质量。我们的生产程序确保胰蛋白酶铂没有任何可检测到的非特异性裂解活性痕迹(图1,面板B)。

自体蛋白水解是胰蛋白酶消化的另一常见副作用。为了抑制胰蛋白酶自身蛋白水解,对用于蛋白质质谱样品制备的胰蛋白酶进行了化学修饰。然而,仍能观察到一定程度的自身蛋白水解(图2,图a)。产生的胰蛋白酶自身蛋白水解肽通常会影响蛋白质分析,特别是在消化反应中使用大量胰蛋白酶时。与目前可用的蛋白质组学和质谱级胰蛋白酶产品中观察到的自身蛋白水解相比,我们的新修饰方法进一步抑制了胰蛋白酶铂的自身蛋白水解(图2,面板B),确保即使使用大量胰蛋白酶铂,自身蛋白水解胰蛋白酶肽的水平仍然可以忽略。leyu乐鱼网

胰蛋白酶铂切割特异性

RP-HPLC-UV数据显示Trypsin Platinum的裂解特异性。

图1。胰蛋白酶铂和其他供应商胰蛋白酶之间的非特异性蛋白水解活性的比较。Panitumumab (Vectibix®)被用作模型蛋白底物。消化反应采用胰蛋白酶:蛋白质1:10的比例。用反相高效液相色谱-紫外分析消化肽。LC-MS对肽峰进行了分配,以区分特异性肽和非特异性肽。分析显示,来自供应商T的质谱仪级胰蛋白酶(用于比较)具有突出的非特异性蛋白水解活性(板一个).近距离分析表明,生成的非特异性裂解具有类似凝乳酶的模式(数据未显示)。相比之下,Trypsin Platinum只产生特定的tryptic裂解(面板B).

胰蛋白酶铂抗自身蛋白水解

RP-HPLC-UV数据显示胰蛋白酶铂具有自溶性。

图2。胰蛋白酶铂和其他供应商的蛋白质组学级胰蛋白酶之间的自蛋白水解活性的比较。来自供应商S的蛋白质组组级胰蛋白酶(用于比较)和trypsin Platinum在常规消化条件下孵育。具体来说,胰蛋白酶产物在100mM Trisleyu乐鱼网-HCl (pH 8)/2mM CaCl中重构237°C孵育过夜。采用反相高效液相色谱-紫外分析自leyu乐鱼网蛋白水解产物。新鲜的、未孵育的胰蛋白酶均作为对照进行分析。蛋白组级胰蛋白酶表现出突出的自身蛋白水解,而胰蛋白酶铂的自身蛋白水解降低到可以忽略不计的水平(相比之下面板A和B).


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胰蛋白酶铂,质谱仪级

VA900A 1 × 100μg

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