质粒纯化

质粒是许多应用中常用的研究工具，包括克隆、转染、细胞游离转录/翻译反应和DNA测序。大多数质粒纯化系统使用改进的碱性裂解方法来裂解细菌细胞，然后进行快速中和步骤，使质粒再生，而不是基因组DNA。然后通过结合到一个柱上来纯化质粒。色谱柱通常用含酒精的溶液清洗以去除污染物，质粒DNA用适当的缓冲液洗脱。多年来，这种“结合、清洗、洗脱”的程序不断改进，以满足日益增长的对简单和快速协议的需求，从而产生高纯度质粒DNA的高产率。

内毒素(脂多糖或LPS)是所有革兰氏阴性菌的细胞壁成分。内毒素是哺乳动物体内免疫系统的一种强有力的刺激物，在体外可能降低组织培养细胞的活力和抑制转染效率。为了达到最大的一致性，当转染多种细胞系时，最好使用含有尽可能少内毒素的质粒DNA。