聚合酶链反应
从端点PCR到定量实时PCR和RT-PCR,我们提供完整的高质量产品组合,以满足您的扩增需求。leyu乐鱼网端点和实时PCR产品以GoTaq®(Taq) DNA聚leyu乐鱼网合酶为方便的主混合物,试剂盒和灵活的酶配方,用于基本PCR,热启动PCR,远程PCR, qPCR和RT-qPCR。
RT-PCR和实时RT-qPCR产品线包括GoTaq®DNA聚合酶和GoScript™逆转录酶,为困难的模板和存在PCR抑制剂提供稳健可靠的逆转录和PCR性能。
所有的PCR系统,酶和试剂都有我们的PCR性能保证。如果您对任何Promega PCR产品不完全满意,我们将为您发送替换产品或退款。
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PCR基础知识
聚合酶链式反应(PCR)是一项革命性的分子生物学核心技术。在PCR中,一个DNA分子被靶向并复制多次,允许目标DNA序列的指数级扩增。
PCR扩增反应的关键成分是耐热DNA聚合酶,脱氧核苷酸三磷酸(dNTPs),反应缓冲液和镁,两个寡核苷酸引物和一个热循环器,允许通过多轮DNA变性,引物结合和DNA延伸控制反应温度的循环。
逆转录PCR (RT-PCR)可以检测RNA序列。在RT-PCR中,RNA靶标在PCR扩增前首先逆转录为DNA。
实时qPCR可提供更灵敏的样品定量分析。在qPCR和RT-qPCR中,随着扩增反应的进行,实时检测标记的反应产物。leyu乐鱼网基于qpcr的方法是量化目标DNA序列或监测基因表达的标准手段。
耐热DNA聚合酶之间的变化被用于优化特定目的的反应。例如,在热启动PCR中,直到达到变性温度,DNA聚合酶才变得活跃。这最大限度地减少了非特异性扩增产物的形成,并允许方便的室温反应设置。leyu乐鱼网热启动反应最有效的方法之一是使用抗体阻断Taq聚合酶活性。
远程PCR可以使用耐热聚合酶的混合物来实现,如Taq DNA聚合酶和一种缺乏3´-5´外切酶活性的校对酶,这种酶会去除合成DNA链中错误结合的碱基。这允许更高的精度和生成更长的目标序列。高保真耐热聚合酶如Pfu具有低错误率,还具有3´至5´外切酶活性。