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聚合酶链反应

从末端PCR到定量实时PCR和RT-PCR,我们提供完整的高质量产品组合,以满足您的扩增需求。leyu乐鱼网端点和实时PCR产品以GoTaq®(Taq) DNA聚leyu乐鱼网合酶为方便的主混合物,试剂盒和灵活的酶制剂,用于基础PCR,热启动PCR,远程PCR, qPCR和RT-qPCR。

RT-PCR和实时RT-qPCR产品线包括GoTaq®DNA聚合酶和GoScript™逆转录酶,在有PCR抑制剂存在的情况下,为困难模板提供强大可靠的逆转录和PCR性能。

所有的PCR系统,酶和试剂都有我们的PCR性能保证。如果您对Promega PCR产品不完全满意,我们将为您更换或退款。

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PCR基础知识

聚合酶链式反应(PCR)是一项彻底改变了分子生物学的核心技术。在聚合酶链反应中,一个DNA分子被靶向复制多次,使目标DNA序列呈指数级扩增。

PCR扩增反应的关键成分是一个耐高温的DNA聚合酶,脱氧核苷酸三磷酸(dNTPs),反应缓冲液和镁,两个寡核苷酸引物和一个热循环器,通过多轮DNA变性,引物结合和DNA延伸控制反应温度的循环。

逆转录PCR (RT-PCR)允许对RNA序列进行查询。在RT-PCR中,RNA靶点在PCR扩增之前首先被逆转录到DNA中。

实时qPCR提供了更灵敏的定量分析样本。在qPCR和RT-qPCR中,随着扩增反应的进行,实时检测标记的反应产物。leyu乐鱼网基于qpcr的方法是量化目标DNA序列或监测基因表达的标准手段。

热稳定性DNA聚合酶之间的变化被用来优化特定目的的反应。例如,在热启动PCR中,DNA聚合酶直到达到变性温度才变得活跃。这最大限度地减少了非特异性扩增产物的形成,并允许方便的室温反应设置。leyu乐鱼网热启动反应最有效的方法之一是使用抗体阻断Taq聚合酶活性。

远程PCR可以使用一种耐热聚合酶的混合物,如Taq DNA聚合酶和一种缺乏3´-5’外切酶活性的校对酶,这种酶会去除合成DNA链中错误结合的碱基。这允许更高的精度和生成更长的目标序列。高保真耐高温聚合酶如Pfu具有较低的误差率,也具有3′至5′外切酶活性。