蛋白定量
利用生物荧光HiBiT蛋白标记系统直接量化细胞蛋白质丰度。这种小的11-氨基酸HiBiT肽使用流线型、无抗体的协议来检测标记蛋白，只需要一个发光计进行检测。灵敏的检测跨越宽线性动态范围检测蛋白质到内源性水平与单一试剂添加的便利。多种HiBiT检测方案为研究蛋白质生物学的研究人员提供了多种可能性。无论您选择通过克隆或使用CRISPR-Cas9基因编辑内源性标记您的蛋白质，HiBiT系统都可以标记和检测细胞质、分泌或表面蛋白的表达。你甚至可以在细胞膜上检测到hibit标记的蛋白质——所有这些都不需要抗体或大量的洗涤步骤。
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为什么要量化蛋白质丰度?
确定细胞蛋白质的丰度是理解正在研究的细胞生物学的基础。对于基于细胞的分析，比较不同实验条件之间的相对丰度通常是相对于测量绝对蛋白质水平的目标。有许多方法可以定量细胞蛋白质丰度，包括比色法、荧光法和生物荧光法。这些方法通常基于凝胶电泳分离，然后是染色或基于抗体的Western blotting。根据可用抗体、所需定量动态范围、通量需求和蛋白表达水平等因素确定理想的检测方法。方法的灵敏度需要与被检测的蛋白质相匹配。例如，细胞中表达水平较高的蛋白质可以用不太灵敏的比色法测量。然而，对于低丰度的蛋白质，可以定量到纳摩尔量的生物发光方法可能是必要的。通过考虑这些因素，你可以确定哪种实验方法最适合定量细胞蛋白表达水平。
