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纳米glo®HiBiT细胞外检测系统

量化细胞表面表达的hibit标记蛋白

  • 细胞外表达或分泌蛋白的特异性活细胞检测
  • 简单的添加-混合-读取检测格式-不需要抗体
  • 量化超过7个线性动态范围的对数

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纳米glo®HiBiT细胞外检测系统
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HiBiT蛋白定量英雄艺术背景

细胞表面蛋白表达的简单生物荧光检测

Nano-Glo®HiBiT细胞外检测系统使用简单的添加-混合-读取检测格式,在几分钟内定量细胞表面或分泌蛋白表达。

使用非溶性Nano-Glo®HiBiT细胞外检测试剂,任何标记有11个氨基酸的HiBiT肽并在细胞外表达的蛋白质都可以被特异性定量。检测试剂含有互补多肽LgBiT,它与HiBiT标签自发相互作用,重建明亮发光的NanoBiT®酶。

发光与细胞外存在的hibit标记蛋白的数量成正比,比例超过七个数量级。

蛋白质定量与检测英雄艺术漂浮

简单的添加-混合-读取分析工作流程

通过添加Nano-Glo®HiBiT胞外检测试剂,与细胞混合并测量发光,可以直接测量细胞外表达的HiBiT标记蛋白的数量。

重组的纳米glo®HiBiT检测试剂包含酶底物和膜不渗透LgBiT肽。只有在细胞表面表达或在培养基中分泌的hibit标记蛋白才会补充细胞外LgBiT,以重建发光的NanoBiT®酶。

与标准的基于抗体的检测相比,高定量的Nano-Glo®HiBiT细胞外检测系统显著减少了处理步骤,节省了您的时间并提高了准确性。

开发定量分析:

  • 受体内化
  • 受体回收
  • 蛋白质或细胞因子分泌
  • 表面蛋白转运
细胞外蛋白检测系统说明

在分钟内测量受体内化

Nano-Glo®HiBiT细胞外检测系统使开发简单、定量的受体内化检测成为可能,这节省了时间并消除了与基于抗体的方法相关的可变性。使用优化的检测试剂可实现蛋白质受体的快速平衡,最大限度地减少井与井之间的变异,并捕获快速变化的生物。例如,在右图中,我们测量了β2-肾上腺素能受体(ADRB2)在暴露于四种完全和部分激动剂时的内化。

报价
我们做了ELISA,现在只使用HiBiT。
——来自爱荷华大学的研究人员
阅读HiBiT是如何用于研究GPCR转运的
蛋白质定量受体内化
受体激动剂 电子商务50 表面残留受体百分比
异丙肾上腺素 50.9纳米 16%
舒喘灵 161海里 45%
氟替卡松加沙美特罗 1.04纳米 63%
Formoterol 2.92纳米 16%

从Bench到HTS

与多孔板和高通量处理的兼容性意味着Nano-Glo®HiBiT细胞外检测系统提供了更多的灵活性和实用性。因此,可以开发膜受体生物学或蛋白分泌的筛选试验,这是标准免疫检测方法无法实现的。

HiBiT-ADRB2在384孔板稳定转染HEK293细胞中的内化

HiBiT蛋白的定量和内化

内源性蛋白质水平测定的敏感性

11aa HiBiT标签的小尺寸使得简单的无克隆基因组编辑成为可能。利用CRISPR-Cas9, HiBiT标签可以精确插入内源性基因座。因此,HiBiT是研究内源性调控膜受体的生物学,减少过表达伪影,并与相互作用的蛋白质保持适当的化学计量学的理想选择。

蛋白质定量和内源性表达ADRB2

规范

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纳米glo®HiBiT细胞外缓冲液

N243A 1 × 10ml

纳米glo®HiBiT细胞外基质

N300A 1 × 0.2ml

LgBiT蛋白质

N401A 1 × 0.1ml

SDS

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分析证书

按地段编号查册

使用限制

仅供研究用途。不用于诊断程序。

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BB

专利和免责声明

通过使用本产品,研究者同意受此有限使用标签许可条款的约束。如果研究人员不愿意接受本标签许可的条款,且产品是未使用的,Promega将接受未使用的产品的退货,并为研究人员提供全额退款。

研究人员只能将本产品用于研究用途;请勿作商业用途。商业使用是指一方为换取对价而对本产品的任何和所有使用,包括但不限于(1)用于进一步的产品制造;(2)在提供服务、信息或数据时使用;以及(3)产品的转售,无论该产品是否转售用于研究。研究者无权修改或以其他方式创造产品的变体。未经Promega事先明确的书面同意,不得擅自使用或转让本产品。

对于将Nano-Glo®品牌试剂用于向基因编码的自荧光蛋白以外的受体进行能量转移(如生物发光共振能量转移),研究人员必须:
(i)使用NanoBRET™品牌的能量受体(例如,bret优化的HaloTag®配体)对该产品的所有能量转移活性进行测定;或
(ii)联系Promega获得使用该产品的许可证,用于对非Promega制造的能量接收器进行能量转移分析。

关于本标签许可以外的任何用途,包括任何诊断、治疗、预防或商业用途,请联系Promega获取供应和许可信息。Promega对产品不作任何明示或默示的陈述或保证,包括关于适销性或适合某一特定用途的陈述或保证。本标签许可的条款应受美国威斯康辛州法律管辖。

美国帕特。No. 8,809,529,欧洲派特。2635582号及其他专利及未决专利。

专利申请中。

美国帕特。第9,797,889号和9,797,890号以及其他未决专利。

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N243B 1 × 100ml

纳米glo®HiBiT细胞外基质

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LgBiT蛋白质

N401B 1 × 1ml

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对于将Nano-Glo®品牌试剂用于向基因编码的自荧光蛋白以外的受体进行能量转移(如生物发光共振能量转移),研究人员必须:
(i)使用NanoBRET™品牌的能量受体(例如,bret优化的HaloTag®配体)对该产品的所有能量转移活性进行测定;或
(ii)联系Promega获得使用该产品的许可证,用于对非Promega制造的能量接收器进行能量转移分析。

关于本标签许可以外的任何用途,包括任何诊断、治疗、预防或商业用途,请联系Promega获取供应和许可信息。Promega对产品不作任何明示或默示的陈述或保证,包括关于适销性或适合某一特定用途的陈述或保证。本标签许可的条款应受美国威斯康辛州法律管辖。

美国帕特。No. 8,809,529,欧洲派特。2635582号及其他专利及未决专利。

专利申请中。

美国帕特。第9,797,889号和9,797,890号以及其他未决专利。

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N243B 10 × 100ml

纳米glo®HiBiT细胞外基质

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LgBiT蛋白质

N401B 10 × 1ml

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研究人员只能将本产品用于研究用途;请勿作商业用途。商业使用是指一方为换取对价而对本产品的任何和所有使用,包括但不限于(1)用于进一步的产品制造;(2)在提供服务、信息或数据时使用;以及(3)产品的转售,无论该产品是否转售用于研究。研究者无权修改或以其他方式创造产品的变体。未经Promega事先明确的书面同意,不得擅自使用或转让本产品。

对于将Nano-Glo®品牌试剂用于向基因编码的自荧光蛋白以外的受体进行能量转移(如生物发光共振能量转移),研究人员必须:
(i)使用NanoBRET™品牌的能量受体(例如,bret优化的HaloTag®配体)对该产品的所有能量转移活性进行测定;或
(ii)联系Promega获得使用该产品的许可证,用于对非Promega制造的能量接收器进行能量转移分析。

关于本标签许可以外的任何用途,包括任何诊断、治疗、预防或商业用途,请联系Promega获取供应和许可信息。Promega对产品不作任何明示或默示的陈述或保证,包括关于适销性或适合某一特定用途的陈述或保证。本标签许可的条款应受美国威斯康辛州法律管辖。

美国帕特。No. 8,809,529,欧洲派特。2635582号及其他专利及未决专利。

专利申请中。

美国帕特。第9,797,889号和9,797,890号以及其他未决专利。

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