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纳米glo®HiBiT裂解检测系统

准确量化细胞中表达的任何hibit标记蛋白

  • 敏感生物发光蛋白检测
  • 简单的添加-读取分析-不需要抗体
  • 量化超过7个线性动态范围的对数

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目录选择数量:N3030

175.00美元
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纳米glo®HiBiT裂解检测系统
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HiBiT蛋白定量英雄艺术背景

简单、灵敏的生物发光蛋白定量

Nano-Glo®HiBiT裂解检测系统使用简单的添加-混合-读取检测格式,在几分钟内定量细胞蛋白,具有高灵敏度和宽动态范围。

11个氨基酸的HiBiT肽标签可以很容易地添加到感兴趣的蛋白质上,并通过添加纳米glo®HiBiT裂解检测试剂来测定细胞中HiBiT标记蛋白质的总量。

检测试剂包含补充多肽LgBiT,它自发地与HiBiT标签相互作用,重建明亮发光的NanoBiT®酶。发光强度与细胞裂解液中hibit标记蛋白的数量成正比,超过7个数量级。发光型发光信号稳定数小时。

蛋白质定量与检测英雄艺术漂浮

快速和简单的蛋白质定量-只需添加,混合和阅读

在Nano-Glo®HiBiT裂解检测系统中,通过简单的添加-混合-读取法直接测量细胞裂解液中HiBiT标记蛋白的数量。纳米glo®HiBiT检测试剂被添加到表达HiBiT标记蛋白的细胞中,溶解细胞并提供发光所需的LgBiT蛋白和呋喃咪嗪底物。

LgBiT蛋白和HiBiT标签之间的高亲和力相互作用重构了发光的NanoBiT®酶。与标准的基于抗体的检测方法相比,这是一种具有较少处理步骤的高定量检测方法。

开发定量分析:

  • 调节蛋白表达
  • 目标蛋白质降解
  • 病毒感染
  • 从基因表达和RNA-seq实验验证蛋白质水平
  • 下拉或短暂转染后的蛋白质丰度
HiBiT蛋白检测与定量说明

精确的蛋白质量化

广泛的线性动态范围精确地量化了标记蛋白,无论表达水平如何,以测量蛋白质丰度的变化。检测限小于10-19年纳米glo®HiBiT裂解检测系统可以在内源性表达水平上量化低丰度的蛋白质。

滴定纯化的hibit标记蛋白以显示线性动态范围
宽线性动态范围与蛋白质定量

研究内源性调控下的蛋白质

使用CRISPR-Cas9基因编辑,hibit标记蛋白可以在内源性调控条件下表达,减少过表达伪影,并与其他内源性结合伙伴或调控机制保持适当的化学计量。

小的11 aa HiBiT标签可以通过以下两种方式之一添加到所需的蛋白质上:

  • 传统的重组方法和你选择的启动子
  • 使用简单的无克隆CRISPR-Cas9插入内源性基因座基因组编辑协议

下载快速,无克隆的CRISPR-Cas9协议HiBiT敲入
Hif1A的HiBiT蛋白定量分析

从Bench到HTS可扩展

简单的协议和超过3小时的发光半衰期使Nano-Glo®HiBiT裂解检测系统非常适合批量处理高通量应用中的多个板。这导致了蛋白质调节的HTS测定的发展,而抗体为基础的方法是不可能的。

诱导HiBiT-BRD4在384孔板中crispr衍生细胞池中的降解
HiBiT蛋白定量靶向降解

现实世界的例子:使用CRISPR基因编辑添加HiBiT到内源性基因

了解被称为HiBiT的微小11-氨基酸发光标签是如何在内源性水平上量化蛋白质丰度的。使用crispr介导的基因编辑将HiBiT标签添加到包括HIF1α在内的几个内源性基因上,并量化对各种刺激的反应蛋白水平。

阅读特稿
HiBiT蛋白定量与标记

规范

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纳米glo®HiBiT裂解基板

N246A 1×0.2毫升

纳米glo®HiBiT裂解缓冲液

N247A 1×10毫升

LgBiT蛋白质

N401A 1×0.1毫升

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使用限制

仅供研究用途。不用于诊断程序。

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专利和免责声明

通过使用本产品,研究者同意受此有限使用标签许可条款的约束。如果研究人员不愿意接受本标签许可的条款,且产品是未使用的,Promega将接受未使用的产品的退货,并为研究人员提供全额退款。

研究人员只能将本产品用于研究用途;请勿作商业用途。商业使用是指一方为换取对价而对本产品的任何和所有使用,包括但不限于(1)用于进一步的产品制造;(2)在提供服务、信息或数据时使用;以及(3)产品的转售,无论该产品是否转售用于研究。研究者无权修改或以其他方式创造产品的变体。未经Promega事先明确的书面同意,不得擅自使用或转让本产品。

对于将Nano-Glo®品牌试剂用于向基因编码的自荧光蛋白以外的受体进行能量转移(如生物发光共振能量转移),研究人员必须:
(i)使用NanoBRET™品牌的能量受体(例如,bret优化的HaloTag®配体)对该产品的所有能量转移活性进行测定;或
(ii)联系Promega获得使用该产品的许可证,用于对非Promega制造的能量接收器进行能量转移分析。

关于本标签许可以外的任何用途,包括任何诊断、治疗、预防或商业用途,请联系Promega获取供应和许可信息。Promega对产品不作任何明示或默示的陈述或保证,包括关于适销性或适合某一特定用途的陈述或保证。本标签许可的条款应受美国威斯康辛州法律管辖。

美国帕特。No. 8,809,529,欧洲派特。2635582号及其他专利及未决专利。

专利申请中。

美国帕特。第9,797,889号和9,797,890号以及其他未决专利。

规范

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纳米glo®HiBiT裂解基板

N246B 2×1毫升

纳米glo®HiBiT裂解缓冲液

N247B 1×100毫升

LgBiT蛋白质

N401B 1×1毫升

SDS

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研究人员只能将本产品用于研究用途;请勿作商业用途。商业使用是指一方为换取对价而对本产品的任何和所有使用,包括但不限于(1)用于进一步的产品制造;(2)在提供服务、信息或数据时使用;以及(3)产品的转售,无论该产品是否转售用于研究。研究者无权修改或以其他方式创造产品的变体。未经Promega事先明确的书面同意,不得擅自使用或转让本产品。

对于将Nano-Glo®品牌试剂用于向基因编码的自荧光蛋白以外的受体进行能量转移(如生物发光共振能量转移),研究人员必须:
(i)使用NanoBRET™品牌的能量受体(例如,bret优化的HaloTag®配体)对该产品的所有能量转移活性进行测定;或
(ii)联系Promega获得使用该产品的许可证,用于对非Promega制造的能量接收器进行能量转移分析。

关于本标签许可以外的任何用途,包括任何诊断、治疗、预防或商业用途,请联系Promega获取供应和许可信息。Promega对产品不作任何明示或默示的陈述或保证,包括关于适销性或适合某一特定用途的陈述或保证。本标签许可的条款应受美国威斯康辛州法律管辖。

美国帕特。No. 8,809,529,欧洲派特。2635582号及其他专利及未决专利。

专利申请中。

美国帕特。第9,797,889号和9,797,890号以及其他未决专利。

规范

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纳米glo®HiBiT裂解基板

N246C 5×4毫升

纳米glo®HiBiT裂解缓冲液

N247B 10×100毫升

LgBiT蛋白质

N401B 10×1毫升

SDS

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仅供研究用途。不用于诊断程序。

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通过使用本产品,研究者同意受此有限使用标签许可条款的约束。如果研究人员不愿意接受本标签许可的条款,且产品是未使用的,Promega将接受未使用的产品的退货,并为研究人员提供全额退款。

研究人员只能将本产品用于研究用途;请勿作商业用途。商业使用是指一方为换取对价而对本产品的任何和所有使用,包括但不限于(1)用于进一步的产品制造;(2)在提供服务、信息或数据时使用;以及(3)产品的转售,无论该产品是否转售用于研究。研究者无权修改或以其他方式创造产品的变体。未经Promega事先明确的书面同意,不得擅自使用或转让本产品。

对于将Nano-Glo®品牌试剂用于向基因编码的自荧光蛋白以外的受体进行能量转移(如生物发光共振能量转移),研究人员必须:
(i)使用NanoBRET™品牌的能量受体(例如,bret优化的HaloTag®配体)对该产品的所有能量转移活性进行测定;或
(ii)联系Promega获得使用该产品的许可证,用于对非Promega制造的能量接收器进行能量转移分析。

关于本标签许可以外的任何用途,包括任何诊断、治疗、预防或商业用途,请联系Promega获取供应和许可信息。Promega对产品不作任何明示或默示的陈述或保证,包括关于适销性或适合某一特定用途的陈述或保证。本标签许可的条款应受美国威斯康辛州法律管辖。

美国帕特。No. 8,809,529,欧洲派特。2635582号及其他专利及未决专利。

专利申请中。

美国帕特。第9,797,889号和9,797,890号以及其他未决专利。

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