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蛋白表达

重组蛋白是一种由基因重组dna编码的蛋白质,该基因在支持基因表达和信使RNA翻译的系统中被克隆。通过重组DNA技术修饰基因可以导致突变蛋白的表达。Promega提供的产品既可用于重leyu乐鱼网组蛋白的细胞表达大肠杆菌系统和各种无细胞系统,如兔网织红细胞裂解物(RRL)或小麦胚芽提取物(WGE)。

什么是蛋白质表达

最常用的无细胞表达系统来源于兔网织细胞,小麦胚芽和大肠杆菌.有两种类型的兔网织粒细胞为基础的无细胞表达系统:翻译系统和耦合翻译和转录(TNT®)系统。两者都提供翻译所需的大分子成分,如核糖体、trna、氨酰基- trna合成酶、起始、延伸和终止因子。利用翻译系统中的mRNA模板或偶联转录和翻译系统中的DNA模板(质粒DNA或PCR片段),可以在几个小时内完成蛋白质合成。

T7 RNA聚合酶系统是生产蛋白质最流行的方法大肠杆菌.在该系统中,一个包含T7启动子下游克隆的感兴趣基因的表达载体被引入到T7表达宿主中。T7表达宿主如DE3菌株具有噬菌体T7 RNA聚合酶基因的染色体副本。当诱导物如IPTG或鼠李糖被添加到培养物中时,T7 RNA聚合酶被表达并转录感兴趣的基因,随后由内源性蛋白质翻译机制翻译所需的蛋白质。Promega提供即时可用的表达重组蛋白的活性细胞大肠杆菌