蛋白表达

最常用的无细胞表达系统来源于兔网织细胞、小麦胚芽和大肠杆菌。有两种基于兔网织细胞的无细胞表达系统:翻译系统和耦合翻译和转录(TNT®)系统。两者都提供翻译所需的大分子成分，如核糖体、trna、氨基酰基- trna合成酶、起始、延伸和终止因子。蛋白质合成可以在几个小时内使用翻译系统中的mRNA模板或耦合转录和翻译系统中的DNA模板(质粒DNA或PCR片段)进行。

T7 RNA聚合酶系统是最流行的生产蛋白质的方法大肠杆菌。在这个系统中，一个包含感兴趣的基因的表达载体，克隆在T7启动子的下游，被引入T7表达宿主。T7表达宿主如DE3菌株具有噬菌体T7 RNA聚合酶基因的染色体拷贝。当将诱导剂如IPTG或鼠李糖添加到培养物中时，T7 RNA聚合酶被表达并转录感兴趣的基因，然后由内源性蛋白质翻译机制翻译所需的蛋白质。Promega为重组蛋白的表达提供了现成的细胞大肠杆菌。