TnT®快速偶联转录/翻译系统为真核无细胞蛋白表达提供方便的单管,偶联转录/翻译反应。这些体外翻译系统将RNA聚合酶、核苷酸、盐、氨基酸和重组RNasin®核糖核酸酶抑制剂与网织细胞裂解液结合,形成单个T细胞nT®快速大师混合。
TnT®快速耦合转录/翻译系统有两种配置,可用于从T7或SP6 RNA聚合酶启动子克隆的下游基因的表达。为了使用这些无细胞蛋白表达系统,0.2-2.0μg含有T7或SP6启动子的圆形质粒DNA,或含有T7启动子的聚合酶链反应生成的片段,被添加到TnT®Quick Master Mix在50μl反应体积中30°C孵育60-90分钟。表达反应产生大量的蛋白质用于各种应用,包括GST下拉和凝胶移位分析。
这些以哺乳动物为基础的系统表达可溶的,功能蛋白,翻译后修饰,不像大肠杆菌的系统。表达蛋白表达后可直接使用;不需要额外的蛋白质纯化。