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蛋白质相互作用

我们提供许多用于蛋白质相互作用分析的产品,leyu乐鱼网包括下拉分析,基于bret和基于互补报告的系统。

GST下拉系统用于基于细胞提取物和/或无细胞表达的传统方法。HaloTag®哺乳动物下拉系统用于从哺乳动物细胞中分离和鉴定细胞内蛋白复合物。

NanoBRET™和NanoBiT®技术提供了直接分析活细胞中蛋白质相互作用的方法。NanoBRET™系统使用生物发光共振能量转移(BRET),通过测量从生物发光蛋白供体到荧光蛋白受体的能量转移来检测蛋白质相互作用。

NanoBiT®检测依赖于基于NanoLuc®荧光素酶的双亚基系统,可用于细胞内蛋白质检测:蛋白质相互作用。亚基与感兴趣的蛋白质融合,形成一种功能酶,当蛋白质相互作用时产生明亮的发光信号。

蛋白质相互作用导论

蛋白质:蛋白质相互作用(PPIs)对细胞中的几乎每个过程都是必不可少的,因此了解PPIs对于理解正常和疾病状态下的细胞生物学至关重要。有许多方法用来表征蛋白质相互作用,使用细胞提取物或活细胞来表达潜在的目标。

在下拉试验中,一种蛋白质伴侣作为融合蛋白(例如,诱饵蛋白)在大肠杆菌然后使用融合标签特有的亲和配体固定。然后将固定的诱饵蛋白与猎物蛋白一起孵育。

共免疫沉淀是研究蛋白质的另一种选择:蛋白质相互作用。为了进行共免疫沉淀,针对目标蛋白的抗体通过蛋白a或G偶联到Sepharose®微球上,然后含有目标蛋白的复合物与抗体偶联微球进行免疫沉淀。

然而,这些研究蛋白质之间相互作用的传统方法并不能直接提供细胞环境下的数据。利用生物发光共振能量转移(BRET)或互补分析,可以定量测量活细胞中蛋白质之间的相互作用。