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蛋白质相互作用

我们提供了许多蛋白质相互作用分析产品,包括leyu乐鱼网下拉分析,基于bret和基于互补报告的系统。

GST下拉系统用于基于细胞提取和/或无细胞表达的传统方法。HaloTag®哺乳动物下拉系统用于从哺乳动物细胞中分离和识别细胞内蛋白复合物。

NanoBRET™和NanoBiT®技术提供了直接分析活细胞中蛋白质相互作用的方法。NanoBRET™系统使用生物发光共振能量转移(BRET)进行基于邻近的检测,通过测量从生物发光蛋白供体到荧光蛋白受体的能量转移来检测蛋白质相互作用。

NanoBiT®检测依赖于基于NanoLuc®荧光素酶的双亚基系统,可用于细胞内蛋白质检测:蛋白质相互作用。亚基与感兴趣的蛋白质融合,形成一种功能酶,当蛋白质相互作用时产生明亮的发光信号。

蛋白质相互作用导论

蛋白质:蛋白质相互作用(PPIs)对细胞中的几乎每一个过程都是必不可少的,因此了解PPIs对于理解正常和疾病状态下的细胞生物学至关重要。有许多方法用于描述蛋白质相互作用,使用细胞提取物或活细胞来表达潜在的靶标。

在一个下拉实验中,一个蛋白伙伴被表达为融合蛋白(例如,诱饵蛋白)大肠杆菌然后用一种适合于融合标签的亲和配体固定。固定化的诱饵蛋白可以与猎物蛋白一起孵育。

免疫共沉淀是研究蛋白质的另一种选择:蛋白质相互作用。为了进行共免疫沉淀,针对目标蛋白的抗体通过蛋白a或G偶联到Sepharose®珠上,然后含有目标蛋白的复合物与抗体偶联珠进行免疫沉淀。

然而,这些研究蛋白质相互作用的传统方法并不能直接在细胞环境中提供数据。利用生物发光共振能量转移(BRET)或互补分析,定量测量活细胞中蛋白质之间的相互作用是可能的。