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蛋白质纯化

蛋白质纯化是蛋白质功能研究的基础,包括从复杂混合物(如细胞裂解液)中表达、富集和纯化感兴趣的蛋白质的一系列过程。最快、最有效的方法是亲和净化。我们提供一系列蛋白质纯化试剂盒和试剂,用于纯化重组蛋白使用亲和标签,如HaloTag, GST-或His-tag。我们还提供Magne®Protein G/A Beads,它提供了一种易于使用和快速的方法,用于从血清、腹水液和细胞培养基中纯化多克隆和单克隆抗体。

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蛋白质纯化基础知识

蛋白质纯化是分析单个蛋白质和蛋白质复合物的基本步骤。由于大肠杆菌易于使用,细胞生长迅速,培养成本低,因此仍然是许多研究人员生产重组蛋白的首选。在大肠杆菌中表达的蛋白质可以得到相对较高的纯度,但这些蛋白质,特别是真核蛋白,可能没有表现出适当的蛋白质活性或折叠性。培养的哺乳动物细胞为生产具有适当翻译后修饰的正确折叠和功能的哺乳动物蛋白质提供了另一种选择。

为了简化纯化,亲和纯化标签可以融合到感兴趣的重组蛋白上。常见的融合标签是多肽,小蛋白或酶添加到重组蛋白的N或c端。纯化重组蛋白的第一步是制备细胞裂解液或上清液。对于分泌蛋白,需要最少的上清制备,然后对纯化蛋白进行选择性结合、洗涤和洗脱。纯化后的蛋白质可以用蛋白酶裂解以去除亲和力标签。