DNA和RNA定量

常用的RNA和DNA定量方法包括吸收法、荧光法和qPCR法。每种方法各有优缺点，方法的选择取决于实验需要和所涉及的下游分析。

吸光度定量方法实施简单，使用常用的实验室设备和试剂。在DNA吸收光最强的260nm处进行吸光度读数，产生的值可以估计浓度。吸收法具有易于使用和检测范围宽的优点，但灵敏度低于基于荧光或qPCR的方法。吸收法不能区分ssDNA, dsDNA或RNA，如果污染物在260nm吸收存在，可能会高估浓度。

基于荧光的定量方法使用染料结合dsDNA, ssDNA或RNA，导致构象移位，在激发时产生荧光。荧光信号与核酸的含量成正比。leyu体育靠谱吗荧光检测方法比吸收法更敏感，特别是对DNA浓度低的样品，快速和容易使用，很容易纳入自动化工作流程。

在实时PCR (real - time PCR, qPCR)中，每轮PCR扩增后使用荧光报告器检测DNA产物的积累。所生成的放大曲线显示了荧光信号与周期数的关系，并绘制了放大产物的积累图。检测阈值是可以将产物积累与背景区分开的荧光水平。扩增产物越过该检测阈值的周期数称为量化周期(Cq)。样品中存在的目标DNA数量越多，Cq值越早。基于qPCR的定量方法的优点包括灵敏度，通过多路复用在单一反应中检测多个目标的能力。由于qPCR是一种基于扩增的方法，它还提供了样本的扩增性信息，这是一个DNA质量指标。