ATP化验
什么是ATP检测?
ATP是所有活细胞的能量来源，参与许多重要的生化反应。当细胞死亡时，它们停止合成ATP，现有的ATP池迅速降解。因此，ATP被广泛认为是活细胞的标志。ATP浓度越高，活细胞数量越多。
ATP检测是一种基于ATP检测来测定细胞活力的方法。所有活细胞，包括细菌，都可以用ATP检测到。可以使用几种检测方法，如比色法、荧光法和生物发光法。由于灵敏度高、方法简单均匀、结果快，大多数研究者选择生物发光ATP法测定细胞活力。
生物发光ATP检测是如何工作的?
生物荧光ATP检测利用了萤火虫荧光素酶的酶促反应，该反应利用活细胞中的ATP产生光子。裂解活细胞释放ATP供检测，添加含有萤火虫荧光素酶酶和底物的试剂催化两步反应。
反应的第一步是荧光素与ATP活化，得到荧光素腺苷酸酯和焦磷酸盐。第二步，荧光素腺苷酸酯与分子氧反应生成电子激发态的氧化荧光素和CO2．激发态的氧化荧光素返回基态，释放出绿色到黄色的发光光(550-570nm)。发光信号的强度用光度计检测。
当ATP为荧光素酶反应的极限组分时，发光与ATP浓度成正比。发光信号越高，ATP水平越高。
发光与ATP浓度的线性相关
使用Water-Glo™系统．
在早期的ATP测定中，荧光素酶反应释放出短暂的“闪光”，仅持续几秒钟。检测如此短的信号需要一个具有自动点胶功能的发光计，无论是单管或多孔板阅读器。
为了改善实验工作流程和减少检测结果的可变性，Promega科学家推导出了一种稳定形式的重组荧光素酶(Ultra-Glo™rLuciferase)，它不受用于溶解细胞的强洗涤剂的影响，可以与ATP酶抑制剂共存，它可以稳定从溶解细胞释放的ATP。Ultra-Glo™r荧光素酶增强了稳定性和灵活性，使ATP检测具有发光信号，可“发光”长达数小时，而历史上的“闪光”检测仅持续几秒钟。
发光型ATP分析为研究人员提供了更灵活的工作流程，使实验中评估的样本数量显著增加，并且不需要任何协议步骤的自动分配器。
如何选择ATP测定法
选择ATP检测的第一步是了解你要用它做什么。ATP在细胞和细胞环境中具有多种功能。因此，ATP检测具有广泛的应用。在研究实验室中，它们通常用于细胞培养实验，以估计存活细胞的数量。这些信息可以回答有关细胞生长的问题，或评估药物或病毒的毒性。
死亡细胞释放的细胞外ATP可作为损伤相关分子模式(DAMP)，专门的ATP测定可用于测量免疫原性细胞死亡等应用。除了基本的生物医学研究外，ATP测定也被用于确定水样、食品和化妆品中是否存在细菌污染。leyu乐鱼网
除了了解预期的用途之外，多种因素将影响选择哪种ATP检测方法。这包括样品的性质，被测样品的数量，所需的灵敏度，以及自动液体处理器和检测仪器的可用性。此外，进行高通量筛选或使用3D细胞培养的研究人员将希望选择一种经过测试和优化的测定方法，以适应这些应用。
由于可用的产品数量众多，选择一种ATP检测方法可能具有挑战性。leyu乐鱼网为了支持ATP检测的广泛应用，我们开发了一系列发光ATP检测，具有不同的配方和针对每种应用优化的推荐协议。参见下表，找到最适合您的应用程序的分析方法。
需要帮助选择合适的化验您的需要?我们的leyu体育是真的吗技术支持团队很乐意为您指路!
| 产品 | 样本类型 | 描述 | 溶解能力 | 信号 半衰期 |
随时可用的单一试剂 | 高温超导性能 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| CellTiter-Glo®2.0细胞活力测定 | 单层/悬浮细胞培养 | 用于高通量应用或日常使用的最方便的ATP测定方法。提供作为单一试剂的液体格式，优化室温存储稳定性，使易于工作流程实施。 | 强大的 | > 3小时 |
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| CellTiter-Glo®发光细胞活力测定 | 单层/悬浮细胞培养 | 原金标准分析法用于高温超导，批次释放试验和一般研究应用。作为冻干底物和缓冲组分提供，在使用前配制成检测试剂。 | 强大的 | > 5个小时 |
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| CellTiter-Glo®3D细胞活力测定 | 三维细胞培养 | 作为单一试剂提供高洗涤浓度，专门优化有效的细胞膜裂解在3D显微组织。 | 非常强烈的 | > 3小时 |
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| RealTime-Glo™细胞外ATP检测 | 单层/悬浮，3D细胞培养 | 活细胞动力学试验检测死亡细胞释放的ATP。 | Non-lytic化验 | 长达24小时的连续发光监测 |
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| 病毒ToxGlo™试验 | 病毒感染的单层/悬浮细胞培养 | 优化方案，以确定病毒诱导的细胞病变作用的宿主细胞体外。 | 强大的 | > 5个小时 |
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| BacTiter-Glo™微生物细胞活力测定 | 培养基中的细菌细胞 | 测量活菌细胞的数量。专为难以溶解的细菌样品设计。可用于单样品分析或高通量应用。 | 非常强烈的 | > 30分钟 |
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| Water- glo™微生物水检测试剂盒 | 水样 | 测量复杂水溶液样品的生物量，如废水，海水和淡水。 | 非常强(分离的裂解和检测步骤) | 3分钟 |
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| ENLITEN®ATP检测系统 | 食品、饮料、木浆、化妆品等。 | 使用闪光化学，优化您自己的方法，以检测细胞，细菌，酵母，真菌和其他微生物在各种样品类型的ATP。 | 裂解试剂不包括在内 | 秒 |
