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Nano-Glo®双荧光素酶报告检测系统

单样品中萤火虫和NanoLuc®荧光素酶活性的超灵敏检测

  • 低表达水平有更高的敏感性
  • 选择firefly或NanoLuc®荧光素酶作为主报告器
  • 试剂稳定性的提高使化验设计更加灵活

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Nano-Glo®双荧光素酶报告检测系统
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最先进的双报告技术带来最大的灵敏度和灵活性

Nano-Glo®双荧光素酶报告酶(NanoDLR™)检测单样品中双荧光素酶,萤火虫和NanoLuc®报告酶的活性。改进的萤火虫化学和明亮、灵敏的NanoLuc®荧光素酶使其成为一种高灵敏度的双荧光素酶检测方法,使用简单,提供优越的数据质量,并在检测设计中具有更大的灵活性。

在NanoDLR™检测方案中,首先使用ONE-Glo™EX荧光素酶检测试剂检测萤火虫荧光素酶活性。然后加入NanoDLR™Stop & Glo®试剂淬灭萤火虫信号,并提供测量NanoLuc®荧光素酶活性所需的底物。

双荧光素酶报告分析,以NanoLuc和萤火虫荧光素酶为特色

明亮稳定的信号

当从同一个启动子表达双荧光素酶时,NanoDLR™检测为Fluc和Nluc报告子提供了具有稳定“发光型”信号的明亮信号。两名记者的信号半衰期都大于两个小时。
NanoLuc和萤火虫双荧光素酶提供更明亮、更稳定的信号
在这里,我们比较了转染TK-Rluc (Renilla):TK-Fluc (firefly):载体DNA或TK-Nluc (NanoLuc):TK-Fluc:载体DNA 1:1:8比例的HEK293细胞的发光信号,并按照指示使用NanoDLR™、DLR™或Dual-Glo®双荧光素酶检测系统进行检测。

更好的淬火,更高的灵敏度

对萤火虫荧光素酶(Fluc)的有效抑制提供了优异的信号分离,从而可以精确测量即使是少量的NanoLuc®荧光素酶(Nluc),即使存在高荧光素酶活性。
最先进的双荧光素酶测定法,具有更好的猝灭效果,灵敏度更高
该数据表明,在NanoDLR™检测中,萤火虫荧光素酶信号被有效地猝灭。NanoDLR™Stop & Glo®试剂将极高的Fluc信号降低到接近背景水平,在不牺牲两个明亮发光读数的灵敏度的情况下,提供优异的信号分离和低可变性。

使用Firefly或NanoLuc®荧光素酶作为主报告器,或使用两者作为
动态的记者

使用Nano-Glo®双荧光素酶报告试剂(NanoDLR™)在不同的配置,以适应您的分析设计。
NanoLuc®作为主报告器
萤火虫作为主要记者
两位主要记者
巧合报告制度

NanoLuc®荧光素酶作为主要报告者

最明亮、响应最快的格式。

  • 最适合:低细胞数,平板放大或挑战性细胞系。
  • 报告器结构:NlucP实验报告器;美国人控制。

突出显示的数据为转染NFkBNanoLuc®PEST载体和TK-Fluc对照的HEK293细胞的发光值,比例为10:1。用TNFα处理细胞,并在处理4小时后用NanoDLR™测定报告活性。

双荧光素酶检测具有NanoLuc报告和萤火虫对照

萤光素酶作为主要报告者

使用现有的萤火虫荧光素酶结构,并添加NanoLuc®荧光素酶,以实现更健壮的控制。

  • 最适合:标准报告分析格式。NanoLuc®荧光素酶控制报告器的亮度高达1000倍Renilla荧光素酶,所以你可以使用较少的对照DNA。
  • 报告结构:flup实验报告器;Nluc控制

高亮显示的数据显示了转染NFkB响应元件ffc - pest载体和TK-Nanoluc®控制载体10:1的HEK293细胞的发光值。用TNFα处理细胞,并在处理4小时后用NanoDLR™测定报告活性。

双荧光素酶测定与萤火虫报告和NanoLuc对照

两位主要记者

同时测量两种不同的生物反应。

  • 最适合:一次测量2个路径以获得最大数据;多重蛋白稳定性和遗传报告分析。
  • 报告器结构:NlucP实验报告器;氟禄普实验记者;Nluc蛋白质稳定性报告器。

在本例中,NanoDLR™检测被用于测量同一样品中的蛋白质动态和基因激活。HEK293细胞瞬间转染pNLF1-HIF1A[CMV/neo]融合结构,稀释1:1000进入缺氧反应元素载体pGL4.42[luc2P/HRE/Hygro]。18小时后,用不同剂量的1,10-菲罗啉刺激细胞,并在指定的时间点使用Nano-Glo®双荧光素酶®报告蛋白(NanoDLR™)测定法检测萤火虫荧光素酶转录报告蛋白和HIF1a-NanoLuc®融合蛋白的表达。

以NanoLuc和萤火虫为记者的双荧光素酶检测

巧合报告制度

从一个单一的开放阅读框表达两个记者。

  • 最适用于:区分HTS中的错误命中与真正影响靶基因表达的化合物。
  • 报告结构:萤火虫- p2a - nanoluc®-PEST结构(pNLCoI向量)。
符合双荧光素酶报告系统与NanoLuc和萤火虫荧光素酶

提高试剂稳定性,简化重复使用,减少浪费

在NanoDLR™检测中,重组的ONE-Glo™EX试剂在室温和7℃下增加了稳定性,减少了在使用之间分配成等分和冷冻试剂的需要。

右边的数据说明了NanoDLR™试剂在重组后的扩展稳定性。重组试剂储存在22°C或7°C,并在规定时间-70°C冷冻。解冻后,试剂与纯化的萤火虫或NanoLuc®荧光素酶结合,相对活性计算为添加酶3分钟后测量的每个样品的发光信号强度,相对于放置在-70°C没有22°C孵育的样品的信号强度;n = 3。

双荧光素酶检测试剂对NanoLuc和萤火虫检测是稳定的
GloMax Discover系统多模版读取器

与许多工作流格式兼容,以支持任何吞吐量规模

Nano-Glo®双荧光素酶报告检测的扩展信号稳定性使得添加-混合-读取检测协议变得简单。试剂可用于注射型协议或与细胞裂解液制成的被动裂解缓冲液。

均质分析格式:直接在生长培养基中测定细胞。两个报告器的信号半衰期为两个小时,支持试剂批量添加到多个板。

基于注射的分析格式:使用光度计将试剂输送到细胞,如GloMax®Discover,配备双注射器或散装试剂分配器。

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研究人员只能将本产品用于研究用途;请勿作商业用途。商业使用是指一方为换取对价而对本产品的任何和所有使用,包括但不限于(1)用于进一步的产品制造;(2)在提供服务、信息或数据时使用;以及(3)产品的转售,无论该产品是否转售用于研究。研究者无权修改或以其他方式创造产品的变体。未经Promega事先明确的书面同意,不得擅自使用或转让本产品。

对于将Nano-Glo®品牌试剂用于向基因编码的自荧光蛋白以外的受体进行能量转移(如生物发光共振能量转移),研究人员必须:
(i)使用NanoBRET™品牌的能量受体(例如,bret优化的HaloTag®配体)对该产品的所有能量转移活性进行测定;或
(ii)联系Promega获得使用该产品的许可证,用于对非Promega制造的能量接收器进行能量转移分析。

关于本标签许可以外的任何用途,包括任何诊断、治疗、预防或商业用途,请联系Promega获取供应和许可信息。Promega对产品不作任何明示或默示的陈述或保证,包括关于适销性或适合某一特定用途的陈述或保证。本标签许可的条款应受美国威斯康辛州法律管辖。

专利申请中。

美国帕特。专利号:7,078,181、7,108,996、7,118,878等。

美国帕特。No. 8,809,529,欧洲派特。2635582号,日本派特。5889910号等专利及未决专利。

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研究人员只能将本产品用于研究用途;请勿作商业用途。商业使用是指一方为换取对价而对本产品的任何和所有使用,包括但不限于(1)用于进一步的产品制造;(2)在提供服务、信息或数据时使用;以及(3)产品的转售,无论该产品是否转售用于研究。研究者无权修改或以其他方式创造产品的变体。未经Promega事先明确的书面同意,不得擅自使用或转让本产品。

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此外,研究人员必须:
(1a)使用Nano-Glo®品牌发光检测试剂(LARs)对本产品及其衍生物的所有发光活性进行测定;或
(1b)联系Promega获得使用非Promega制造的LARs的产品及其衍生产品的许可。

对于将Nano-Glo®品牌LARs用于将能量转移(如生物发光共振能量转移)到基因编码的自荧光蛋白以外的受体,研究人员必须:
(2a)使用NanoBRET™品牌的能量受体(例如,bret优化的HaloTag®配体)对本产品及其衍生物的所有能量转移活性进行测定;或
(2b)联系Promega获得使用该产品及其衍生品的许可证,用于对非Promega制造的能量接收器进行能量转移分析。

研究人员可以将衍生品转让给他人用于研究用途,前提是在转让时将本标签许可的副本提供给接受者,而接受者同意受本标签许可条款的约束。关于本标签许可以外的任何用途,包括任何诊断、治疗、预防或商业用途,请联系Promega获取供应和许可信息。Promega对产品不作任何明示或默示的陈述或保证,包括关于适销性或适合某一特定用途的陈述或保证。本协议条款受美国威斯康辛州法律管辖。

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美国帕特。专利号:7,078,181、7,108,996、7,118,878等。

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Nano-Glo®双荧光素酶报告检测系统

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pNL1.1.PGK [Nluc/ PGK]向量

N1441 1 × 20μg

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研究人员只能将本产品用于研究用途;请勿作商业用途。商业使用是指一方为换取对价而对本产品的任何和所有使用,包括但不限于(1)用于进一步的产品制造;(2)在提供服务、信息或数据时使用;以及(3)产品的转售,无论该产品是否转售用于研究。研究者无权修改或以其他方式创造产品的变体。未经Promega事先明确的书面同意,不得擅自使用或转让本产品。

对于将Nano-Glo®品牌试剂用于向基因编码的自荧光蛋白以外的受体进行能量转移(如生物发光共振能量转移),研究人员必须:
(i)使用NanoBRET™品牌的能量受体(例如,bret优化的HaloTag®配体)对该产品的所有能量转移活性进行测定;或
(ii)联系Promega获得使用该产品的许可证,用于对非Promega制造的能量接收器进行能量转移分析。

关于本标签许可以外的任何用途,包括任何诊断、治疗、预防或商业用途,请联系Promega获取供应和许可信息。Promega对产品不作任何明示或默示的陈述或保证,包括关于适销性或适合某一特定用途的陈述或保证。本标签许可的条款应受美国威斯康辛州法律管辖。

通过使用本产品,研究者同意受此有限使用标签许可条款的约束。如果研究人员不愿意接受此有限使用声明的条件,且产品未使用过,Promega将接受未使用产品的退货,并为研究人员提供全额退款。

研究人员只能将本产品用于研究用途;本产品不得转让或用于商业用途。商业使用是指一方为换取对价而对本产品或衍生品的任何和所有使用,包括但不限于(1)用于进一步的产品制造;(2)在提供服务、信息或数据时使用;(3)转售产品或其衍生品,不论该产品或衍生品是否为研究用途而转售。研究人员无权修改或以其他方式创建荧光素酶基因的核苷酸序列变体,但研究人员可以(1)创建融合基因序列,条件是产生的荧光素酶基因的编码序列与完整的荧光素酶基因序列相比,在受影响的端缺少不超过4个脱氧核苷酸;(2)在剪接研究中,根据编码荧光素酶的失活或发光重建leyu体育靠谱吗来插入和删除核酸序列。未经Promega事先明确书面同意,不得授权使用本产品或衍生品。

此外,研究人员必须:
(1a)使用Nano-Glo®品牌发光检测试剂(LARs)对本产品及其衍生物的所有发光活性进行测定;或
(1b)联系Promega获得使用非Promega制造的LARs的产品及其衍生产品的许可。

对于将Nano-Glo®品牌LARs用于将能量转移(如生物发光共振能量转移)到基因编码的自荧光蛋白以外的受体,研究人员必须:
(2a)使用NanoBRET™品牌的能量受体(例如,bret优化的HaloTag®配体)对本产品及其衍生物的所有能量转移活性进行测定;或
(2b)联系Promega获得使用该产品及其衍生品的许可证,用于对非Promega制造的能量接收器进行能量转移分析。

研究人员可以将衍生品转让给他人用于研究用途,前提是在转让时将本标签许可的副本提供给接受者,而接受者同意受本标签许可条款的约束。关于本标签许可以外的任何用途,包括任何诊断、治疗、预防或商业用途,请联系Promega获取供应和许可信息。Promega对产品不作任何明示或默示的陈述或保证,包括关于适销性或适合某一特定用途的陈述或保证。本协议条款受美国威斯康辛州法律管辖。

美国帕特。专利号:7,078,181、7,108,996、7,118,878等。

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Nano-Glo®双荧光素酶报告检测系统

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pGL4.54 [luc2/ TK)向量

E5061 1 × 20μg

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研究人员只能将本产品用于研究用途,不得用于商业用途。“商业用途”指一方为金钱或其他对价而对本产品及其衍生品的任何和所有使用,可包括但不限于以下用途:(1)产品制造;(二)提供服务、信息或者数据;和/或转售产品或其衍生品,无论该产品或衍生品是否转售用于研究。研究人员无权修改或以其他方式创造荧光素酶基因核苷酸序列的变体,但研究人员可以:(1)创建融合基因序列,条件是所得荧光素酶基因的编码序列与完整的荧光素酶基因序列相比,在受影响的末端缺失的脱氧核苷酸不超过4个;(2)在拼接研究中根据编码荧光素酶的发光失活或重建预测插入和删除核酸序列。leyu体育靠谱吗未经Promega事先明确书面同意,不得擅自使用或转让本产品或衍生产品。此外,研究人员必须:(1)使用从Promega购买的发光检测试剂对本产品及其衍生物的发光活性进行所有测定;或(2)联系Promega获得使用本产品及其衍生产品的许可。研究人员可以将衍生品转让给他人用于研究用途,前提是在转让时将本标签许可的副本提供给接受者,而接受者同意受本标签许可条款的约束。 With respect to any uses outside this label license, including any diagnostic, therapeutic or prophylactic uses, please contact Promega for supply and licensing information. PROMEGA MAKES NO REPRESENTATIONS OR WARRANTIES OF ANY KIND, EITHER EXPRESSED OR IMPLIED, INCLUDING FOR MERCHANTABILITY OR FITNESS FOR A PARTICULAR PURPOSE WITH REGARDS TO THE PRODUCT. The terms of this label license shall be governed under the laws of the State of Wisconsin, USA. This label license relates to Promega patents and/or patent applications on improvements to the luciferase gene.

美国帕特。专利号:7,078,181、7,108,996、7,118,878等。

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Nano-Glo®双荧光素酶报告检测系统

N1610 1 × 10ml

pGL4.53 [luc2/ PGK]向量

E5011 1 × 20μg

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专利和免责声明

通过使用本产品,研究者同意受此有限使用标签许可条款的约束。如果研究人员不愿意接受本标签许可的条款,且产品是未使用的,Promega将接受未使用的产品的退货,并为研究人员提供全额退款。

研究人员只能将本产品用于研究用途;请勿作商业用途。商业使用是指一方为换取对价而对本产品的任何和所有使用,包括但不限于(1)用于进一步的产品制造;(2)在提供服务、信息或数据时使用;以及(3)产品的转售,无论该产品是否转售用于研究。研究者无权修改或以其他方式创造产品的变体。未经Promega事先明确的书面同意,不得擅自使用或转让本产品。

对于将Nano-Glo®品牌试剂用于向基因编码的自荧光蛋白以外的受体进行能量转移(如生物发光共振能量转移),研究人员必须:
(i)使用NanoBRET™品牌的能量受体(例如,bret优化的HaloTag®配体)对该产品的所有能量转移活性进行测定;或
(ii)联系Promega获得使用该产品的许可证,用于对非Promega制造的能量接收器进行能量转移分析。

关于本标签许可以外的任何用途,包括任何诊断、治疗、预防或商业用途,请联系Promega获取供应和许可信息。Promega对产品不作任何明示或默示的陈述或保证,包括关于适销性或适合某一特定用途的陈述或保证。本标签许可的条款应受美国威斯康辛州法律管辖。

通过使用本产品,研究者同意受此有限使用标签许可条款的约束。如果研究人员不愿意接受本标签许可的条款,且产品是未使用的,Promega将接受未使用的产品的退货,并为研究人员提供全额退款。
研究人员只能将本产品用于研究用途,不得用于商业用途。“商业用途”指一方为金钱或其他对价而对本产品及其衍生品的任何和所有使用,可包括但不限于以下用途:(1)产品制造;(二)提供服务、信息或者数据;和/或转售产品或其衍生品,无论该产品或衍生品是否转售用于研究。研究人员无权修改或以其他方式创造荧光素酶基因核苷酸序列的变体,但研究人员可以:(1)创建融合基因序列,条件是所得荧光素酶基因的编码序列与完整的荧光素酶基因序列相比,在受影响的末端缺失的脱氧核苷酸不超过4个;(2)在拼接研究中根据编码荧光素酶的发光失活或重建预测插入和删除核酸序列。leyu体育靠谱吗未经Promega事先明确书面同意,不得擅自使用或转让本产品或衍生产品。此外,研究人员必须:(1)使用从Promega购买的发光检测试剂对本产品及其衍生物的发光活性进行所有测定;或(2)联系Promega获得使用本产品及其衍生产品的许可。研究人员可以将衍生品转让给他人用于研究用途,前提是在转让时将本标签许可的副本提供给接受者,而接受者同意受本标签许可条款的约束。 With respect to any uses outside this label license, including any diagnostic, therapeutic or prophylactic uses, please contact Promega for supply and licensing information. PROMEGA MAKES NO REPRESENTATIONS OR WARRANTIES OF ANY KIND, EITHER EXPRESSED OR IMPLIED, INCLUDING FOR MERCHANTABILITY OR FITNESS FOR A PARTICULAR PURPOSE WITH REGARDS TO THE PRODUCT. The terms of this label license shall be governed under the laws of the State of Wisconsin, USA. This label license relates to Promega patents and/or patent applications on improvements to the luciferase gene.

美国帕特。专利号:7,078,181、7,108,996、7,118,878等。

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