双荧光素酶报告系统

双荧光素酶报告(DLR™)检测系统提供了一种进行两种报告分析的有效方法。在DLR™检测中，萤火虫的活动(Photinus pyralis),Renilla（Renilla reniformis或海三色堇)的荧光素酶是按顺序从单个样品中测定的。

首先通过添加荧光素酶测定试剂II (LAR II)来测量萤火虫荧光素酶报告，以产生持续至少一分钟的发光信号。量化萤火虫的发光后，这个反应被淬火，和Renilla荧光素酶反应通过向同一样品中添加Stop & Glo®试剂同时启动。使用带有试剂自动注入器的光度计，两种测定都可以在大约4秒内完成。在DLR™检测系统中，两种报告都产生了带有attomole的线性分析(<10^-18年)敏感性，在实验宿主细胞中无内源性活性。此外，DLR™检测的集成格式可在转染细胞或无细胞转录/翻译反应中对两种报告物进行快速定量。

为了获得最佳的双荧光素酶检测结果，我们建议使用经过验证的光度计。这些光度计通过了DLR认证伊迪法官明确指出™。有关合格仪器的清单，请访问DLR伊迪法官明确指出™验证luminometer页面。

pGL4荧光素酶报告载体设计用于DLR™检测系统。一个Renilla具有本构表达的荧光素酶载体可与任何实验性萤火虫荧光素酶载体联合用于共转染哺乳动物细胞。

关于猫的注意事项。# E1960和E1980:提供足够的被动裂解缓冲液，以96孔板中培养的细胞(通常为每孔20μl 1X PLB)进行1000次分析。对于需要更多裂解试剂的应用(如>100μl/孔)，可单独购买额外的被动裂解缓冲液。

分析优势

• 归一化到Renilla荧光素酶内部控制可以得到更准确的结果。
• 样品不需要分割，节省了盘子和时间。
• 允许研究弱启动子、低水平表达/调控和转染不良细胞中的表达。
• 线性除以7对数;活性很高的样品通常不需要稀释。