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具有在脯氨酸和丙氨酸后裂解的蛋白酶的治疗性抗体的特性

部分#PS416

摘要

胰蛋白酶以外的蛋白酶对蛋白质质谱表征很重要,因为它们有助于增加序列覆盖率和识别翻译后修饰。像胰蛋白酶一样,最常用的替代蛋白酶也在带电残基上裂解,因此需要在蛋白质组中独特的位点上裂解的蛋白酶。

在这里,我们描述了ProAlanase的特性,一种蛋白酶,优先裂解蛋白质在脯氨酸和丙氨酸残基的c端。在酸性pH值(~1.5-2.0)下,用ProAlanase消化的最佳时间为1-2小时,这抑制了样品制备伪影的引入,并最大限度地减少了非特异性消化。

酶在还原性和非还原性条件下都能成功消化IgG,这有助于初步结构覆盖、PTMs和二硫键的表征。

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