利用蛋白酶的正交切割特异性改进治疗性抗体的肽定位

部分#PS321

摘要

克里斯·霍斯菲尔德，迈克尔·罗森布拉特和玛杰塔·乌尔
Promega公司，2800伍兹空心路，麦迪逊，威斯康星州53711

治疗性蛋白质的肽图谱通常用胰蛋白酶进行。虽然胰蛋白酶是一种优秀的蛋白酶，但胰蛋白酶产生的肽图并不总是完整的，胰蛋白酶肽可能不适合监测所有重要的质量属性。在这种情况下，使用具有正交序列覆盖的替代蛋白酶可以帮助填补这些空白。在本研究中，我们报道了一种新的重组asp特异性蛋白酶raspp - n的特性，并利用NISTmAb参考IgG开发了一种有效的消化方案，与单独的胰蛋白酶相比，提高了序列覆盖率。我们进一步说明了如何通过在数据收集之前结合来自两种蛋白酶的摘要，在一次注射中增加序列覆盖率。

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