如何将细胞代谢分析整合到你的研究中:考虑因素和挑战
- 实验设计中的关键因素:灵敏度、线性范围、细胞介质和控制
- 细胞、培养基和组织的简单样品制备策略
- 通过对多种代谢物进行定量，并通过活力和归一化分析进行复用，从单个样品中获得更多信息
- 监测T细胞活化和癌细胞株生长过程中代谢产物水平随时间的变化
总结
细胞代谢包括一个动态的通路网络，通过重新编程来响应外部和内部信号。这种重编程在正常的细胞功能和许多疾病状态中起着至关重要的作用，使癌症代谢和免疫代谢成为研究和药物发现的重要领域。代谢物水平提供了有关途径活性的有价值的信息，而基于平板的偶联酶反应分析可以提供一种快速测量特定代谢物的方法。然而，目前基于平板的代谢物检测方法可能带来挑战，特别是在样品制备、重现性和吞吐量方面。
在本次网络会议上，我们将讨论新的基于平板的生物发光测定法，用于测量关键代谢产物葡萄糖、乳酸、谷氨酰胺和谷氨酸，并演示使用这些测定法来研究糖酵解和谷氨酰胺解这两种主要的燃料代谢途径。我们将讨论设计实验时要考虑的因素，包括测定灵敏度和线性范围，以及样品制备方法的选择。
演讲者
唐娜Leippe博士
资深研究科学家
Donna Leippe博士在Promega的研发部门担任高级研究科学家，拥有超过18年的技术开发和领导研究项目的经验。她是检测设计组的成员，专注于开发细胞代谢研究的生物发光技术。这包括用于测量细胞辅因子(NAD/NADH-Glo™和NADP/NADPH-Glo™测定法)和多种细胞代谢物(乳酸- glo™，葡萄糖- glo™，谷氨酸- glo™和谷氨酰胺/谷氨酸- glo™测定法)的测定法。Donna在威斯康星大学麦迪逊分校完成研究生和博士后工作后加入Promega，在那里她在分子病毒学研究所和McArdle癌症研究实验室学习病毒免疫学。