自下而上:用重组Asp-N和多酶工作流改进蛋白质组学样品制备
胰蛋白酶消化常在蛋白质序列中留下空白。在这次网络研讨会上，Hosfield博士描述了使用一种新的重组Asp-N蛋白酶来填补空白的优势。
总结
自底向上的质谱工作流程通常使用胰蛋白酶消化蛋白质为适合LC-MS/MS分析的多肽。胰蛋白酶是一种优良的蛋白酶，替代蛋白酶在许多应用中都很有用，包括增加蛋白质序列覆盖率和识别翻译后修饰。
在这次网络研讨会上，Hosfield博士描述了一种新的重组Asp-N蛋白酶(rAsp-N)的特征。rastin - n具有较高的解理效率和解理n端对天冬氨酸的强烈偏好。他将解释如何有效地使用这种酶来消化各种类型的样品，包括复杂的蛋白质混合物和治疗分子，如单克隆抗体。
此外，他还描述了如何利用多酶方法成功地从一次注射中实现IgG的100%序列覆盖。在LC-MS/MS分析之前，将消化得到的肽与正交蛋白酶结合可能是确保高序列覆盖同时减少仪器时间需求的一般策略。
演讲者
克里斯Hosfield博士
资深研究科学家
Promega公司
克里斯·霍斯菲尔德是Promega公司蛋白质分析小组的高级研究科学家。他领导了蛋白质组学和抗体表征工具的开发，包括PNGase F和IdeS和重组Asp-N蛋白酶。
Chris在蛋白质水解酶和为质谱分析制备蛋白质样品方面有广泛的专业知识。在加入Promega之前，Chris在几家生物技术公司担任高级科学家职位，在那里他将蛋白质组学方法应用于小分子和生物疗法的发现和开发。他在皇后大学获得了生物化学博士学位。