用crispr介导的标记研究内源性蛋白质动态:了解您的选择
主题包括:
- 一种高效、无克隆的敲入HiBiT和其他蛋白质标签的方法
- 这些内源性修饰的细胞如何被用于不同的分析格式
- 自己动手的方法，池和稳定克隆的可用性，以及对分析开发的支持
总结
CRISPR/Cas9技术通过提供一种在内源性位点标记蛋白质的简单方法，彻底改变了基因组编辑，促进了蛋白质生物学的研究，同时保持适当的转录调控、表达水平和结合伙伴的化学计量学。相比之下，标记蛋白的异位表达可导致多种过表达假象，如定位错误、聚集或降解失调。HiBiT是一种11-氨基酸生物发光肽，由于其体积小，线性动态范围大，是内源性标记的理想标签。
在本次网络研讨会上，我们将重点介绍一种高效的、无克隆的HiBiT敲入方法，以及其他蛋白质标签，我们将讨论如何将这些内源性修饰细胞用于各种检测格式，以研究蛋白质丰度、定位、修饰和相互作用。此外，我们将讨论diy方法，池和稳定克隆的可用性，以及对分析开发的支持。
演讲者
克里斯托弗·埃格斯博士
高级研究科学家
Christopher Eggers博士在加州大学旧金山分校获得生物化学和分子生物学博士学位，然后在加州大学圣地亚哥分校的霍华德·休斯医学研究所完成博士后研究。自2011年以来，Eggers博士一直是Promega的高级研究科学家，在那里他主要专注于NanoLuc®和NanoBiT®技术的开发，以创建新的生物发光分析方法，简化蛋白质动力学的测量。